[发明专利]一种检测雪茄烟中多酚化合物的方法

权利要求书

1.一种检测雪茄烟中多酚化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，雪茄烟样品的处理；

步骤2，配制标准溶液；

步骤3，对样品进行高效液相色谱法测定；利用高效液相色谱仪对标准工作溶液和样品萃取溶液进行检测，分析条件为色谱柱：使用Agilent Luna 3u PFP（2）色谱柱，150mm×4.6mm ，填料粒度3μm，柱温：30℃；流动相A：水：甲醇：乙酸体积分数为88:10:2；流动相B：水：甲醇：乙酸体积分数为10：88：2；柱流量：0.8mL/min；进样体积：10μL；检测器：紫外检测器;紫外检测器波长为:340nm 参比波长:480nm，梯度：二元溶剂流动相梯度如下：

；

所述步骤1中，首先配制萃取溶液：按水：甲醇：乙酸体积分数为10：88：2配制成萃取溶液，混匀；

称取1g样品，准确至0.1 mg，置于25 mL锥形瓶内，再准确加入10 mL 萃取溶液，置于超声波振荡器超声提取20 min；取适量萃取溶液经0.45 µm的水相滤膜过滤后，转移至2 mL色谱瓶中，进行HPLC分析；

所述步骤2具体为：分别称量5 mg新绿原酸、100 mg绿原酸、5 mg隐绿原酸、5 mg莨菪亭、100 mg芸香苷，准确至0.1 mg，加入30 ml甲醇完全溶解后，转移到100 mL的容量瓶中，加萃取溶液稀释至刻度，配制成一级标准溶液，此溶液密封于4℃存放，有效期为一年；然后各取10 mL一级标准溶液移至100mL容量瓶中用萃取溶液稀释至刻度，此为二级标准溶液，密封于4℃存放，有效期为3个月；然后分别准确移取1 mL、2 mL、5 mL二级标准溶液，1 mL、2mL、5 mL一级标准溶液至100 mL容量瓶中用萃取溶液稀释至刻度，此六个标准溶液以及二级标准溶液作为系列标准校准溶液；在4℃冰箱内存放，有效期为3个月；

所述步骤3中，采用高效液相色谱仪测定绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、莨菪亭、芸香苷的标准系列工作曲线溶液，得到5种化合物的积分峰面积，分别用5种化合物的积分面积作为纵坐标，各化合物的浓度作为横坐标，建立5种化合物的校正曲线；对校正数据进行线性回归，R²应不小于0.99；各化合物的标准工作曲线及检测限如下：

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