[发明专利]一种同时检测多种外源性和内源性甾体激素的方法有效
| 申请号： | 202110826643.1 | 申请日： | 2021-07-21 |
| 公开（公告）号： | CN113406254B | 公开（公告）日： | 2023-03-07 |
| 发明（设计）人： | 谭晓杰;赵镇文;郏征伟;廖承慧;徐永威 | 申请（专利权）人： | 裕菁科技(上海）有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/02;G01N30/72 |
| 代理公司： | 上海段和段律师事务所 31334 | 代理人： | 李佳俊;郭国中 |
| 地址： | 200131 上海市浦东新区(上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 同时 检测 多种 外源性 内源 性甾体 激素 方法 | ||
1.一种同时检测多种外源性和内源性甾体激素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、将待测样品进行前处理；
B、将步骤A处理后的待测样品在SPE板上样；
C、加入乙腈和水的混合溶液进行洗脱；
D、再加入己烷洗脱，弃去洗脱液；
E、加入甲醇和乙腈的混合溶液进行洗脱，收集洗脱液；
F、将步骤E的洗脱液稀释后注入LC-MS质谱仪进行检测分析，得多种外源性和内源性甾体激素的含量；
所述外源性和内源性甾体激素的检测种类为54种或以上；
步骤A中，所述待测样品为血清样品或尿液样品；所述待测样品为尿液样品时，其前处理的方法包括：将尿液样品中加入磷酸盐缓冲液，再加入葡萄糖醛酸化酶进行酶解，55℃孵育1个小时，冷却至室温；所得上清液进行后续处理；
所述尿液样品、磷酸盐缓冲液和葡萄糖醛酸化酶的添加体积比为2：1：0.05；
葡萄糖醛酸化酶选用来源于罗曼蜗牛的β-葡萄糖醛酸酶；
步骤C中，所述乙腈和水的混合溶液中，乙腈和水的体积比为1:9；
步骤D中，所述己烷为正己烷；
步骤E中，所述甲醇和乙腈的混合溶液中，甲醇和乙腈的体积比为1:9；
步骤F中，采用所述LC-MS质谱仪进行分析时，采用的液相分析条件为：
色谱柱采用C18色谱柱；
采用的流动相A为水；流动相B为乙腈和含有0.1％FA的甲酸铵水溶液的混合液，其中甲酸铵水溶液在混合液中的浓度为10mM；
采用的流动相梯度条件为：
。
2.根据权利要求1所述的同时检测多种外源性和内源性甾体激素的方法，其特征在于，所述待测样品为血清样品时，其前处理的方法包括：将血清样品中加入甲醇和水，斡旋离心，所得上清液进行后续处理。
3.根据权利要求1所述的同时检测多种外源性和内源性甾体激素的方法，其特征在于，当同时检测的外源性和内源性甾体激素为54种化合物时，采用的质谱分析条件为：
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于裕菁科技(上海）有限公司，未经裕菁科技(上海）有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110826643.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
