[发明专利]一种基于锰离子诱导的比率型荧光反应检测碱性磷酸酶、心肌钙蛋白活性的方法和应用

权利要求书

1.一种基于锰离子诱导的比率型荧光传感平台检测锰离子的方法，其特征在于：在室温下，pH7.4，10mM Tris-HCl缓冲液中加入10mM左旋多巴和10g/mL乙二胺混合，合成了荧光强度高、稳定性好的左多巴纳米颗粒LFC，Mn²⁺的加入导致LFC的快速聚集，随着Mn²⁺浓度的增加，460 nm处的荧光强度减弱，550 nm处荧光强度增强；将不同浓度的Mn²⁺水溶液分别加入到上述左旋多巴和乙二胺混合溶液中；震荡摇匀，通过荧光光谱仪对加入锰离子的左旋多巴和乙二胺混合溶液进行荧光强度检测，通过比率型荧光值F₅₅₀/F₄₆₀的变化检测锰离子。

2.根据权利要求1所述的基于锰离子诱导的比率型荧光传感平台检测锰离子的方法，其特征在于：在真实水样中进行锰离子含量检测。

3.根据权利要求1所述的基于锰离子诱导的比率型荧光传感平台检测锰离子的方法，其特征在于：将不同浓度的Mn²⁺的水溶液分别加入400μL左旋多巴和乙二胺混合溶液中，震荡摇匀，反应15 min后，通过荧光光谱仪对加入锰离子的左旋多巴和乙二胺混合溶液进行荧光强度检测。

4.一种基于锰离子诱导的比率型荧光传感平台检测碱性磷酸酶的方法，其特征在于：用于非疾病的治疗或诊断，在室温下pH7.4，10mM Tris-HCl缓冲液中加入10mM左旋多巴和10g/mL乙二胺混合，合成了荧光强度高、稳定性好的左多巴纳米颗粒LFC，Mn²⁺的加入导致LFC的快速聚集，随着Mn²⁺浓度的增加，460 nm处的荧光强度减弱，550 nm处荧光强度增强；

当LFC/Mn²⁺与三聚磷酸根离子P₃O₁₀^5-孵育时，P₃O₁₀^5-与Mn²⁺配位，取代了LFC/Mn²⁺中的锰离子，导致LFC/Mn²⁺在 550 nm处荧光强度的减弱，当碱性磷酸酶ALP加入传感体系时，ALP水解P₃O₁₀^5-生成磷酸从而释放Mn²⁺，游离的Mn²⁺再次诱导LFC聚集，恢复了LFC/Mn²⁺在 550 nm处的发射，基于LFC/Mn²⁺的发射转变，通过比率型荧光值F₅₅₀/F₄₆₀可快速、灵敏的检测ALP。

5.根据权利要求4所述的基于锰离子诱导的比率型荧光传感平台检测碱性磷酸酶的方法，其特征在于：在人体血清中进行碱性磷酸酶的定量检测。

6.根据权利要求4或5所述的方法制备检测碱性磷酸酶的试剂盒。