[发明专利]一种基于胞内分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的产品、应用及使用方法

说明书

本发明公开了一种基于胞内分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的产品及其应用，属于生物蛋白技术领域。通过胞内分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白（EEC）联合使用，可快速（24h内）鉴别结核病和NTM病，当胞内分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白（EEC）的迟发性超敏反应均呈全阳性时，为结核病；当胞内分支杆菌纯蛋白衍生物的迟发性超敏反应为呈阳性，重组结核杆菌融合蛋白（EEC）的迟发性超敏反应为呈阴性时，为NTM病。而提出一种基于胞内分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的产品及其应用，进而快速鉴别结核病和NTM病，为患者的准确治疗方案提供可靠的依据。

技术领域

本发明涉及一种蛋白产品及其应用，尤其涉及一种基于胞内分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的产品、应用及使用方法，属于生物蛋白技术领域。

背景技术

结核病是一种严重危害人类和动物健康的慢性传染病，于2019年，全球结核病死亡人数140万。据WTO发布的2020全球结核病年度报告：2019年全球结核病发病人数估计1000万左右(890-1100万)；其中，印度264万，占26％；印尼84.6万，占8.5％；中国83.3万，占8.4％。中国结核病人数世界排名第三，为结核病高负担国家。

对于非结核分枝杆菌病(NTM病)，我国的流行病学数据表明，NTM病感染呈上升趋势；我国历次的结核病流行病学调查资料表明，在所有分枝杆菌病人分离株中，1990年NTM分离率为4.9％，2000年NTM分离率为11.1％，到2010年增加到22.9％。NTM感染是我国面临的重大公共卫生问题，NTM在中国的菌种分布有很大的地域差异性，总体分布特点是，沿海高于内地，南方高于北方，气候温和地区高于寒冷地区。

非结核分枝杆菌病(NTM病)与结核病的临床症状很接近，很容易被当作结核病来治疗，但两者的治疗方案是完全不同的，且NTM病抗药性非常强。

其中，NTM病的治疗方案包括：对于治疗结核病的异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)和吡嗪酰胺，NTM病耐药性很高。通常使用喹诺酮类，如：环丙沙星(Ciprofloxacin)、氧氟沙星(Ofloxacin)或氟罗沙星(Fleroxacin)；大环内酯类，如：阿奇霉素(Agithromycin AZ)或克拉霉素(clarithromycin，Cear)；头孢菌素类，如：头孢酊(Cefoxintin，Cet)或头孢克肟(Cefixime)；氨基糖苷类，如：阿米卡星(丁氨卡那霉素AuiKacia，AM)、卷曲霉素(Capreomycin，Cap)、庆大霉素(Gentamicin，Gm)、利福布汀(Rifabutin，Rb)、环丝氨酸(Cycloserin，Cy)或乙硫异烟胺(Ethionamide，Ethion)。此外，如：亚胺培南(Imipenen)，四环素(Tetracyclines，Tz)、多西环素(Doxycycline，Dox)、对氨水杨酸钠(PAS)和磺胺甲噁唑(Sulfamethoxazole)亦有一定疗效。

结核病的治疗方案包括：常见的一线抗结核药物主要包括异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)和吡嗪酰胺，常用的抗结核的一线治疗方案为6个月的治疗方案，前2个月是异烟肼、利福平、乙胺丁醇和吡嗪酰胺的四种药物联合；后4个月是两种药物联合，主要是指异烟肼和利福平联合。

目前，NTM病的诊断方法有：高效液相色谱法(HPLC)，分子生物学方法(包括吖啶酯标记的DNA探针测定法、PCR或多重PCR法、PCR-限制性片段长度多态性分析法、DNA测序技术、反向杂交DNA扩增技术)等。

基于NTM病和结核病临床症状接近，但两者治疗方案截然不同，而对于常规的NTM病诊断方法，一般耗时较久(30天以上)，可能严重影响患者的治疗，因此，急需一种能简单、快捷的检测试剂。