[发明专利]一种乙醇脱氢酶激活肽及其制备方法在审
申请号: | 202110835661.6 | 申请日: | 2021-07-23 |
公开(公告)号: | CN113444759A | 公开(公告)日: | 2021-09-28 |
发明(设计)人: | 余凤杰 | 申请(专利权)人: | 余凤杰 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;A23L33/18;A61K38/01;A61P25/32 |
代理公司: | 上海首言专利代理事务所(普通合伙) 31360 | 代理人: | 刘宏博 |
地址: | 210095 江苏省南京市玄*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乙醇 脱氢酶 激活 及其 制备 方法 | ||
1.一种乙醇脱氢酶激活肽的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一、以新鲜鲫鱼鱼鳔为原料提取胶原蛋白;
步骤二、模拟胃肠道消化,采用胃蛋白酶、胰蛋白酶酶解所得胶原蛋白肽;
步骤三、经分离纯化及合成技术得到乙醇脱氢酶激活肽。
2.根据权利要求1所述的一种乙醇脱氢酶激活肽的制备方法,其特征在于,所述步骤二中所用酶解条件为取5g粗提取物溶解在30mL水中,与4%(w/w)胃蛋白酶在pH=2的条件下混合,于37℃酶解2小时,再将pH调至7.5,添加4%(w/w)胰酶,37℃酶解2小时。
3.根据权利要求1所述的一种乙醇脱氢酶激活肽的制备方法,其特征在于,所述分离纯化包括超滤和Sephadex G-25凝胶色谱。
4.根据权利要求1所述的一种乙醇脱氢酶激活肽的制备方法,其特征在于,所述分离纯化包括以下步骤:
S1、利用截留分子量为3kDa的超滤膜对酶解产物进行超滤分离,收集分子量小于3kDa的组分;
S2、采用Sephadex G-25凝胶色谱对上述组分进行分离,以超纯水为洗脱液,以0.5mL/min的流速洗脱,通过紫外检测器在280nm处测量每个洗脱液的吸光度,以此来评估其乙醇脱氢酶的激活率;
S3、收集经凝胶色谱分离的具有最佳抗氧化活性的峰,采用UHPLC-LTQ-Orbitrap质谱仪对该峰所包含肽段进行氨基酸测序,获得log(峰面积)7.29(75%分位数)的六种肽段,氨基酸序列分别为TGLDGR、GLpGER、GPpGER、KYEEVAR、GATGER和GFSGER。
5.一种乙醇脱氢酶激活肽的应用,其特征在于,所述肽可应用于功能性解酒保健品和药品中。
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