[发明专利]一种乙醇脱氢酶激活肽及其制备方法

说明书

本发明公开了一种乙醇脱氢酶激活肽的制备方法及其应用，涉及食品生物技术领域，包括以下步骤：步骤一、以新鲜鲫鱼鱼鳔为原料提取胶原蛋白；步骤二、模拟胃肠道消化，采用胃蛋白酶、胰蛋白酶酶解所得胶原蛋白肽；步骤三、经分离纯化及合成技术得到乙醇脱氢酶激活肽。本发明中，使用鲫鱼鱼鳔进行肽的提取，有效地利用了水产副产物，解决了鱼肉边角料处理问题，实现了鱼鳔在食品保健等领域的高值化利用，开辟水产副产物提质增效新途径。使用胃肠道模拟消化来进行肽的制取具有良好的胃肠道稳定性，有利于其体内疗效。本发明提供的天然乙醇脱氢酶激活肽以具有高蛋白的鲫鱼鱼鳔为原料，为天然生物活性肽，食用更安全。

技术领域

本发明涉及食品生物技术领域，尤其涉及一种乙醇脱氢酶激活肽及其制备方法。

背景技术

肝脏是酒精代谢的主要器官。在肝脏中，90％的酒精被乙醇脱氢酶(ADH)氧化为乙醛，然后乙醛被乙醛脱氢酶氧化为乙酸。长期过量饮酒或短期大量饮酒会导致肝损伤并增加酒精性肝病(ALD)的风险。虽然酒精性肝损伤的发病机制尚未完全解释，但许多研究表明，其与酒精积累引起的氧化应激、脂质过氧化和线粒体功能障碍有关。加快酒精代谢速度是改善急性酒精性肝损伤的一种策略。然而，除了酒精戒断之外，还没有临床上令人满意的治疗ALD的药物。因此，从天然产物中寻找安全有效的成分预防急性酒精性肝损伤是一个热门话题。源自天然蛋白质的生物活性肽引起了越来越多的兴趣。已有研究报道玉米肽和鸡胸肌水解物可促进体内酒精代谢。此外，源自鲑鱼皮的胶原蛋白肽可以改善大鼠的急性酒精中毒。

鲫鱼肉质好，营养价值高，价格适中，中低收入人群可以负担得起，是中国大部分地区的首选鱼类。鲫鱼鳔是鱼类加工的副产品。虽然它富含胶原蛋白，但由于体积小，通常被当作废物丢弃。一项调查表明，中国每年产生的鱼类废弃物在42万吨至65万吨之间，约占当地水产养殖业的50％。这不仅是对资源的巨大浪费，而且会造成严重的环境污染。

肝脏ADH活性水平被证明是控制酒精代谢速率的关键因素。增加ADH的活性可以减少酒精对肝脏的毒性作用。因此，本发明的目的是从鲫鱼鳔中鉴定一种ADH激活肽，并评估其对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。这些实验可能有助于我们更有效地利用鲫鱼鳔，并为功能性食品和生物医学材料确定一种抗醉成分。

为此，我们提出一种乙醇脱氢酶激活肽及其制备方法来解决上述问题。

发明内容

本发明提供一种乙醇脱氢酶激活肽及其制备方法，解决了背景技术中提出的技术问题。

为解决上述技术问题，本发明提供的一种乙醇脱氢酶激活肽的制备方法，

步骤一、以新鲜鲫鱼鱼鳔为原料提取胶原蛋白；

步骤二、模拟胃肠道消化，采用胃蛋白酶、胰蛋白酶酶解所得胶原蛋白肽；

步骤三、经分离纯化及合成技术得到乙醇脱氢酶激活肽。

一种乙醇脱氢酶激活肽，所述肽的氨基酸序列为GLpGER。

优选的，所述步骤二中所用酶解条件为取5g粗提取物溶解在30mL水中，与4％(w/w)胃蛋白酶在pH＝2的条件下混合，于37℃酶解2小时，再将pH调至7.5，添加4％(w/w)胰酶，37℃酶解2小时。

优选的，所述分离纯化包括超滤和Sephadex G-25凝胶色谱。

优选的，所述分离纯化包括以下步骤：

S1、利用截留分子量为3kDa的超滤膜对酶解产物进行超滤分离，收集分子量小于3kDa的组分；

S2、采用Sephadex G-25凝胶色谱对上述组分进行分离，以超纯水为洗脱液，以0.5mL/min的流速洗脱，通过紫外检测器在280nm处测量每个洗脱液的吸光度，以此来评估其乙醇脱氢酶的激活率；