[发明专利]一种小鼠早衰模型及其构建方法与应用有效
申请号: | 202110842679.9 | 申请日: | 2021-07-26 |
公开(公告)号: | CN113528572B | 公开(公告)日: | 2023-06-20 |
发明(设计)人: | 史丽云;张薇;沙舟;冀鹏 | 申请(专利权)人: | 浙江树人学院(浙江树人大学) |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;A01K67/027 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 仲凌霞;肖明芳 |
地址: | 312000 浙江省绍*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 小鼠 早衰 模型 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种小鼠早衰模型的应用,其特征在于,所述小鼠早衰模型为通过Cre-loxp系统敲除小鼠骨髓来源细胞中的乙肝病毒X蛋白结合蛋白编码基因中的第二个外显子;所述乙肝病毒X蛋白HBXIP结合蛋白编码基因的mRNA序列为GenBank中的Accession: NM_026774.2,其基因组序列为GenBank中的Accession: NC_000069.7;所述应用为所述小鼠早衰模型在开发或筛选预防和/或治疗早衰产品中的应用,或所述小鼠早衰模型在开发或筛选预防和/或治疗早衰技术方法中的应用;所述Cre-loxp系统敲除中运用Optimized Cas9/CRISPRSystem技术,将核苷酸序列如SEQ ID No.3所示的gRNA-1,核苷酸序列如SEQ ID No.4所示的gRNA-2,核苷酸序列如SEQ ID No.5所示的SSODN同源重组模板导入小鼠受精卵中获得HBXIPfl/+小鼠;将HBXIPfl/+小鼠与HBXIPfl/+小鼠交配,获得HBXIPfl/fl纯合子小鼠;将HBXIPfl/fl小鼠与LysMcre/+小鼠交配,获得HBXIPfl/+-LysMcre/+小鼠;将HBXIPfl/+-LysMcre/+小鼠与HBXIPfl/+-LysMcre/+小鼠交配,获得HBXIPfl/fl- LysMcre/+小鼠。
2.根据权利要求1所述小鼠早衰模型的应用,其特征在于,所述敲除为通过骨髓细胞特异性表达Cre重组酶小鼠LysMcre/+敲除。
3.根据权利要求1所述小鼠早衰模型的应用,其特征在于,步骤(1)中,所述HBXIPfl/+小鼠为将C57BL/6小鼠中乙肝病毒X蛋白结合蛋白基因组序列的第762位核苷酸后插入如SEQID No.1所示的核苷酸序列,第1250位核苷酸后插入如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
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