[发明专利]一种小鼠早衰模型及其构建方法与应用

说明书

本发明公开了一种小鼠早衰模型及其构建方法与应用，所述小鼠早衰模型是通过敲除小鼠骨髓来源细胞中的乙肝病毒X蛋白结合蛋白而获得的。该早衰小鼠在4‑8个月龄时出现脱毛、衰老相关基因表达显著上调、血清中衰老相关的分泌表型因子上调、组织器官衰老等典型的早衰表型。本发明通过操控骨髓来源的免疫细胞条件性敲除HBXIP，诱导小鼠早衰具有显著的创新性和良好的应用前景，可用于建立延缓衰老的个性化药物/食材/技术方法等的筛选平台，同时，可用于研究衰老相关疾病，如神经退行性疾病、代谢性疾病、自身免疫及炎症性疾病等发病机制研究，以及相关疾病的预防、诊断和治疗等技术和产品研发。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中，具体涉及一种小鼠早衰模型及其构建方法与应用。

背景技术

早衰即过早衰老，是指由于各种内在的或外在的原因使机体过早地出现生理上、体质上和心理上衰弱的现象，且其病理机制尚未明确。因此，衰老相关疾病已成为全球科研领域亟需解决和突破的热点及难点，延缓衰老是保证社会稳定、经济持续性发展的必要条件。

利用小鼠等模式生物衰老模型能更好地认识人类衰老的进程，为临床转化研究提供有效的工具和理论基础。常见的小鼠衰老模型主要包括D-半乳糖小鼠衰老模型、γ射线照射诱导小鼠衰老模型、胸腺摘除诱导小鼠衰老模型。除自然衰老小鼠模型以外，目前常见的小鼠衰老模型主要包括D-半乳糖注射小鼠衰老模型、胸腺摘除诱导小鼠衰老模型、γ射线照射诱导小鼠衰老模型等，这三种常见的小鼠衰老模型的构建方法及存在的缺陷如下所述：1)D-半乳糖注射法小鼠衰老模型：小鼠腹腔注射D-半乳糖生理盐水溶液500毫克/千克/天，连续2个月成模。每天注射D-半乳糖比较繁琐，注射造模时间较长，需要2个月左右，且由于小鼠的个性差异较大，不易控制；2)胸腺摘除小鼠衰老模型：麻醉小鼠，剥离并取出胸腺，缝合切口并滴加青霉素，继续常规饲养6个月成模。该造模方法对试验技术要求较高，在摘除胸腺时容易导致小鼠死亡，有一定的差异性。其耗费时间更长，需要6个月。胸腺摘除小鼠，对于衰老的某些免疫指标无法进行定性或定量的测定，难以判断是否达到理想的衰老状态，影响模型的可信度；3)γ射线照射诱导小鼠衰老模型：小鼠给予3Gy全身照射(照射面积为25cm×25cm，高度为80cm，时间为5min)，每10天一次，共8次，总计24Gy，80天后成模型。但是如果辐射剂量过大，则会使试验动物容易死亡，无法进行试验，因此要掌握好辐射的度和时间。

乙肝病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B X-interacting protein,HBXIP)，是一种主要存在于哺乳动物的细胞组成型蛋白，分子量约为19kDa。HBXIP能够抑制乙型肝炎病毒的复制，促进肿瘤细胞的增殖和迁移，抑制LPS诱导的急性肺损伤和内毒素血症等。研究表明HBXIP促进细胞周期蛋白上调，抑制细胞周期负调控因子p21、p27表达，从而促进细胞增殖。HBXIP通过MDM2促进肿瘤抑制因子p53的降解，加速乳腺癌的生长。此外，HBXIP是晚期内体/溶酶体适配器以及MAPK和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白LAMTOR复合物的成员之一，参与调控mTORC1的活化，影响细胞的合成代谢、翻译、转录、脂质合成、自噬等过程。因此，HBXIP是参与机体重要生命活动的调节因子。本发明提供了一种基于HBXIP条件敲除的小鼠早衰模型构建及相关应用。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种小鼠早衰模型。

本发明还要解决的技术问题是提供上述小鼠早衰模型的构建方法。

本发明最后要解决的技术问题是提供上述小鼠早衰模型的应用。

为了解决上述第一个技术问题，本发明公开了一种小鼠早衰模型，其特征在于，敲除小鼠骨髓来源细胞中的乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)。

其中，所述敲除为敲除乙肝病毒X蛋白结合蛋白编码基因中的第二个外显子。