[发明专利]一种聚球藻血管紧张素转化酶抑制肽及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种聚球藻血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法，所述抑制肽的序列为Val-Thr-Tyr（VTY），其特征在于，包括如下步骤：

（1）收集聚球藻，加水混匀，藻水比0.03~0.05，单位g/mL，压力破碎后离心收集上清液，向上清液中加入thermolysin蛋白酶，thermolysin蛋白酶的加量为聚球藻质量的2~5%，70~75℃酶解2~4小时，沸水浴终止酶解，得酶解液；

（2）将步骤（1）酶解液离心收集上清液，经3 kDa超滤膜超滤，得到肽分子量3 kDa的肽液；

（3）将步骤（2）得到的肽液利用TSK gel G2000 SW_XL凝胶柱进一步分离纯化，ddH₂O作为洗脱液，流速0.5 mL/min，洗脱体积30 mL，并在220 nm处测定吸光度，收集洗脱体积在20-22 mL的组分，得血管紧张素转化酶抑制肽。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述thermolysin蛋白酶的酶活为30-175 U/mg。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述thermolysin蛋白酶的加量为聚球藻质量的2%。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述酶解的条件为：温度70℃，pH 7.0~8.0，转速150 rpm，酶解2~4小时。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述沸水浴的时间为10~15min。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）和（2）所述离心为10000~15000rpm离心10~15 min。