[发明专利]一种检测畜禽产品中甲巯咪唑药物的酶联试剂盒

说明书

本发明涉及一种检测畜禽产品中甲巯咪唑药物的酶联试剂盒，包括包被有甲巯咪唑偶联蛋白抗原的微孔反应板、多份浓度不同的甲巯咪唑标准品溶液、添加有鼠源抗甲巯咪唑抗体的抗体工作液、添加有辣根过氧化酶标记的抗小鼠IgG抗体的酶标记物、含有TMB的显色剂、终止液、洗涤液、样本稀释液。该发明采用间接竞争ELISA方法，具有灵敏度高、特异性强、能快速准确的检测产品中甲巯咪唑药物的残留。

技术领域

本发明涉及食品检测，尤其是一种检测畜禽产品中甲巯咪唑药物的酶联试剂盒。

背景技术

ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)是酶联免疫吸附检测的简称，是继免疫荧光和射免疫技术之后发展起来的一种酶免技术,被广泛应用在免疫学检验的各领域中，ELISA检测试剂盒则常用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗体ELISA检测。

甲巯咪唑(Thiamazole)是咪唑类抗甲状腺药物，其化学成分是甲巯咪唑，为带刻痕的圆形薄膜衣片，其作用机制是抑制甲状腺内过氧化物酶，从而阻碍吸聚以甲状腺内碘化物的氧化及络氨酸的偶联，阻碍甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)合成，可抑制B淋巴细胞合成抗体，降低血循环中甲状腺刺激性抗体的水平，使抑制性T细胞功能恢复正常，作为激素常被用在禽类养殖中以增加禽肉产量，但会导致肉质变差，同时其也是一种3类致癌物，对人体有较大危害，但却没有一种能快速准确检测甲巯咪唑的方法，无法确保食品的安全。

发明内容

针对现有的不足，本发明提供一种检测畜禽产品中甲巯咪唑药物的酶联试剂盒。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种检测畜禽产品中甲巯咪唑药物的酶联试剂盒，包括包被有甲巯咪唑偶联蛋白抗原的微孔反应板、多份浓度不同的甲巯咪唑标准品溶液、抗体工作液、酶标记物、显色剂、终止液、洗涤液、样本稀释液；所述甲巯咪唑标准品溶液包括七份，其浓度分别是0ng/ml、0.5ng/ml、1.5ng/ml、4.5ng/ml、13.5ng/ml、40.5ng/ml、1μg/ml；所述抗体工作液是添加有鼠源抗甲巯咪唑抗体的溶液，所述鼠源抗甲巯咪唑抗体在抗体工作液中的重量百分比是0.005-0.006％；所述酶标记物是添加有辣根过氧化酶标记的抗小鼠IgG抗体的溶液，所述辣根过氧化酶标记的抗小鼠IgG抗体在酶标记物中的重量百分比是0.009-0.012％；所述显色剂是含有浓度为0.045-0.055mg/ml TMB的溶液。

作为优选，所述微孔反应板通过如下方法制得：将纯化过后的甲巯咪唑偶联蛋白的抗原，用碳酸盐缓冲液稀成浓度为0.28-0.31μg/ml的抗原包被液，混匀后以100±2μl/孔的量加入到微孔板中，温度在4±0.5℃下放置14小时-16小时，之后甩掉孔内液体，以洗涤液洗涤，洗涤后甩干并以150±2μl/孔的量加入封闭液，在室温下放置至少4小时，之后甩干并进行干燥封装。

作为优选，所述封闭液包括如下重量百分比的组分：蔗糖2％-20％、牛血清白蛋白0.1％-2％、小牛血清0.05％-1％、酪蛋白0.5％-2％、聚乙烯吡咯烷酮0.1％-2％。

作为优选，所述抗体工作液是在pH值为7.0-8.0，浓度为0.02-0.2mol/L的磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液中添加如下重量百分比的组分制成：牛血清白蛋白0.05％-0.1％、防腐剂0.01％-0.1％、保护剂0.1％-0.5％、鼠源抗甲巯咪唑抗体0.005％。

作为优选，所述述酶标记物包括如下重量百分比的组分：蔗糖2％-20％、牛血清白蛋白0.1％-2％、小牛血清0.05％-1％、酪蛋白0.5％-2％、聚乙烯吡咯烷酮0.1％-2％、吐温-20 0.01％-0.5％、防腐剂0.01％-0.1％、酶保护剂0.1％-0.5％、0.009-0.012％辣根过氧化酶标记的抗小鼠IgG抗体。