[发明专利]一种软骨组织消化方法

权利要求书

1.一种软骨组织消化方法，其特征在于包括：

取软骨组织；

将所述软骨组织处理成碎片；

在所述碎片中加入胶原酶溶液，预消化1-2小时；收集上清，提取细胞，用无菌PBS冲洗剩余的软骨碎片，重新加入胶原酶原液，进行二次消化2-3小时；之后收集上清，提取细胞；

重复所述二次消化步骤，直至所述碎片消化完全或得到所需要的细胞数量为止。

2.根据权利要求1所述的一种软骨组织消化方法，其特征在于，所述二次消化步骤进行三次以上。

3.根据权利要求1所述的一种软骨组织消化方法，其特征在于，所述软骨组织为兔软骨组织。

4.根据权利要求3所述的一种软骨组织消化方法，其特征在于，所述兔软骨组织为兔耳软骨组织、兔肋软骨组织、兔鼻中隔软骨组织或兔膝关节软骨组织。

5.根据权利要求3所述的一种软骨组织消化方法，其特征在于，所述兔软骨组织取自体重为0.7-1.0千克的新西兰白兔。

6.根据权利要求1或3所述的一种软骨组织消化方法，其特征在于，所述软骨组织先进行下述处理：

所述软骨组织在氯霉素溶液中浸泡20-40分钟，用无菌PBS溶液清洗。

7.根据权利要求1或2所述的一种软骨组织消化方法，其特征在于，所述胶原酶溶液为将NB4胶原酶溶解于Dulbecco的改良Eagle培养基。

8.根据权利要求7所述的一种软骨组织消化方法，其特征在于，所述胶原酶溶液的终浓度为1.5mg/mL。