[发明专利]具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）间充质干细胞外泌体的提取分离：培养间充质干细胞，超速离心法提取外泌体；

（2）载有小分子肽的传递体制备：称取磷脂，胆固醇，边缘活性剂，加入小分子肽溶液，采用薄膜分散法制备含有小分子肽的传递体混悬液；

（3）透皮肽修饰的载有小分子肽的传递体-外泌体膜融合载体的构建：将步骤（1）的外泌体和步骤（2）的传递体混悬液混合，采用挤出法使得载有小分子肽的传递体与外泌体的膜融合，加入透皮肽，混合后离心弃去上清，得到透皮肽修饰的载有小分子肽的传递体-外泌体膜融合载体；

（4）植物精油凝胶的制备：称取植物精油、增溶剂、纯化水混合均匀，形成植物精油的均相溶液；称取卡波姆粉末，均匀分散于植物精油均相溶液表面，溶胀过夜，形成植物精油凝胶；

（5）具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合美容制剂：将步骤（3）的膜融合载体与步骤（4）的植物精油凝胶混合，搅拌均匀，即得；

步骤（2）中所述边缘活性剂为吐温80、胆酸钠、去氧胆酸钠中的一种或几种的组合物；所述小分子肽为寡肽-1、三肽-1和六肽-12中的一种或几种的组合物；

步骤（3）中所述透皮肽由十一个氨基酸组成，序列为ACTGSTQHQCG；

步骤（4）中所述植物精油为桉叶油、荷荷巴油、乳木果油、鳄梨油、杏仁油中的一种或几种。

2.根据权利要求1所述的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述磷脂为大豆磷脂(SPC)、蛋黄卵磷脂(EPC)、氢化大豆磷脂(HSPC)、二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述磷脂与胆固醇的质量比为9:5-1，边缘活性剂与总脂质的质量比为1:5-7，小分子肽与总脂质的质量比为1:10-80，薄膜分散法中的成膜及水合温度为25-55℃。

4.根据权利要求1所述的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述外泌体与传递体的质量比为5:1-1:5，透皮肽与膜融合载体的质量比为0.1-0.6:1；挤出法使用滤膜为聚碳酸酯膜，滤膜孔径包括5 μm、1 μm、400 nm和200nm，每种滤膜反复挤出10-20次。

5.根据权利要求1所述的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）中植物精油、增溶剂、卡波姆的质量比为0.25-2.5:2-10:0.25-2。

6.根据权利要求1所述的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂的制备方法，其特征在于，步骤（5）中膜融合载体与植物精油凝胶的质量比为2:1-1:2。

7.一种权利要求1所述的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂的制备方法所制备的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂。

8.一种权利要求1所述的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂的制备方法所制备的具有透皮增强作用的传递体-外泌体膜融合制剂在制备皮肤深层美白的试剂或者药物中的应用。