[发明专利]一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法在审
申请号: | 202110860657.5 | 申请日: | 2021-07-28 |
公开(公告)号: | CN113621678A | 公开(公告)日: | 2021-11-09 |
发明(设计)人: | 刘丹丹;唐代苹;石艳红;李启蒙 | 申请(专利权)人: | 山东和康源生物育种股份有限公司;兰陵和康源生物育种有限公司 |
主分类号: | C12Q1/24 | 分类号: | C12Q1/24;C12Q1/10;C12R1/42 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 卢正伟 |
地址: | 250101 山东省济南市高新区港兴三*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 方便快捷 鉴定 养殖场 沙门氏菌 方法 | ||
1.一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、实验材料准备,预先对所需材料进行杀菌消毒和校准作业;
S2、环境样本、垫料样本和饲料样本的采样,对样本的增菌处理,随后采用ss培养基进行菌落接种培养,待观察和分析;
S3、器官样本的采样处理,随后进行增菌处理,采用ss培养基进行菌落接种培养,待观察和分析;
S4、种鸡泄殖腔棉拭子弱雏样本采集,先进行增菌处理,随后将增菌液接种到无色透明中心黑色的菌落接种于沙门显色培养;
S5、沙门显色培养和ss培养基平板进行观察,选择纯化后的菌液进行进一步的分子生物方法鉴定沙门氏菌的种属。
2.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S1中的操作步骤,所述实验环境消毒,操作台用75%酒精擦洗,然后实验室及超净台采用紫外线消毒30min,棉签、镊子、平皿、生理盐水高压灭菌121℃ 20min,提前配制sc液体增菌液、ss培养基、沙门显色培养基。
3.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S2中的操作步骤,所述饲料样本采用双手用75%酒精棉球擦拭消毒,取10克样品放入90毫升的SC增菌液中,置于37℃ 100rpm恒温摇床进行前增菌18-24h。
4.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S2中的操作步骤,所述鸡舍内垫料可采用鞋套法采集的样品,用灭菌的棉签蘸取无菌的生理盐水使棉签的棉团稍湿润,涂抹鞋套采样的一面,然后放入sc增菌液中,一个鸡舍可采5个样品,棉签增菌一般采用试管增菌,于37℃温箱中培养18-24h。
5.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S2中的操作步骤,所述环境样本双手用75%酒精棉球擦拭消毒,用灭菌的棉签蘸取无菌的生理盐水使棉签的棉团稍湿润,涂抹鞋套采样的一面,然后放入sc增菌液中,根据送检样品采取5个样品合样,棉签增菌一般采用试管增菌,于37℃温箱中培养18-24h。
6.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S2中的操作步骤,所述环境样本、垫料样本和饲料样本的取增菌液划线接种于ss培养基上,置37℃温箱中培养22-24小时后将无色透明中心黑色的菌落接种与沙门显色培养基上培养22-24h。
7.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S3中的操作步骤,所述器官样本为肝脏与卵黄,所述双手用75%酒精棉球擦拭消毒,用酒精棉球处理器官表面,使用无菌手术刀切开器官,无菌取少量组织匀浆,放入3ml的sc增菌液中,置37℃温箱中培养18-24小时;取上述增菌液划线接种子ss培养基上,置37℃温箱中培养22-24小时后将无色透明中心黑色的菌落接种于沙门显色培养基上培养22-24h后看结果。
8.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S4中的操作步骤,所述种鸡泄殖腔棉拭子:用无菌棉签采集种鸡泄殖腔后放入3ml的sc增菌液中,置37℃温箱中培养18-24小时后;取上述增菌液划线接种于ss培养基上,置37℃温箱中培养22-24小时后将无色透明中心黑色的菌落接种于沙门显色培养基上培养22-24h后看结果,所述弱雏检测采用步骤3检测方法。
9.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S5中的操作步骤,所述ss培养基结果判定标准为生长情况和菌落颜色。
10.据权利要求1所述的一种方便快捷鉴定养殖场沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据S5中的操作步骤,所述沙门显色培养基结果判定标准为生长情况和菌落颜色。
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