[发明专利]芦竹的种质保存方法

权利要求书

1.一种芦竹的种质保存方法，其特征在于，包括：

1）采集所述芦竹的未成熟花序，去除所述花序的外层叶片至保留最内层心叶后，对所述花序进行第一消毒处理，然后去除所述最内层心叶，对所述花序进行第二消毒处理；

2）将步骤1）中处理后的所述花序接种到愈伤组织诱导培养基上，并于25±2℃的温度下黑暗培养30-36d，以便诱导出愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基的配方为：MS+2.0-4.0mg/L 2.4-D+0.1-0.3mg/L KT，pH值为6.0；

3）将所述愈伤组织从所述花序上剪切下来接种到丛生芽分化培养基上，并于25±2℃、光照强度2000-2200lx、每日光照12h进行培养，每30天继代培养一次，2-3个月后分化出丛生芽；所述丛生芽分化培养基的配方为：MS+4.0mg/L 6-BA+0.4 mg/L IBA，pH值为6.0；

4）将所述丛生芽分株转接到丛生芽增殖培养基上，并于25±2℃、光照强度2000-2200lx、每日光照8h，培养30-40d，以便使得所述丛生芽增殖；所述丛生芽增殖培养基配方为：MS+4.0-6.0mg/L 6-BA+0.4-0.6mg/L IBA，pH值为6.0；

5）选取步骤4）中的优质丛生芽，分株转接到种质保存培养基上，并于16-20℃、光照强度800-1200lx、每日光照12h的培养条件下进行种质保存培养，每5-7个月继代培养一次，所述种质保存培养基配方为：1/3MS+2.0-4.0mg/L ABA +0.2-0.4mg/L NAA+25-28g/L甘露醇，pH值为6.0；

6）将步骤5）中的待复壮种质转接到复壮培养基上，并于25±2℃、光照强度2000-2200lx、每日光照12h的培养条件下进行复壮15-20d，以便获得所述芦竹的复壮种质苗，所述种质复壮培养基配方为：MS+3.0-5.0mg/L 6-BA，pH值为6.0。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一消毒处理包括：首先用75%的酒精消毒1-2min，再用无菌蒸馏水冲洗2-3次；所述第二消毒处理包括：将所述花序放至0.1%的升汞溶液中消毒6-7min，再用无菌蒸馏水冲洗3-5次。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤5）中，当培养温度为16℃时，继代培养5次；当培养温度为20℃时，继代培养8次。