[发明专利]一种鸭坦布苏病毒抑制剂有效
| 申请号： | 202110878638.5 | 申请日： | 2021-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN113501866B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 张琳;徐敏丽;吴家强;焦安琪;于江;张玉玉;陈智;任素芳;孙文博 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C07K14/18 | 分类号： | C07K14/18;C12N15/40;C12N15/70;A61K38/16;A61P31/14 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 牛芳 |
| 地址： | 250100 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鸭坦布苏 病毒 抑制剂 | ||
1.一种鸭坦布苏病毒E D III蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）构建重组大肠杆菌，诱导表达获得E D III蛋白包涵体；
（2）将包涵体复性、纯化后获得E D III蛋白的溶液；
所述重组大肠杆菌的目的基因序列如SEQ ID NO: 1所示；所述重组大肠杆菌的含目的基因的载体质粒为pET21a；所述目的基因通过Nde I和Xho I双酶切连接入pET21a质粒。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述重组大肠杆菌选自Rosetta gamiB(DE3)，BL21(DE3)或Origami (DE3)。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述E D III蛋白的纯度不小于90%。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）之后还包括蛋白结晶的步骤：将E D III蛋白液以悬滴气相扩散法在结晶溶液中生长获得E D III蛋白晶体；结晶溶液组成为：22%-23%w/v Poly 5100、0.015-0.02M MgCl2、0.1M HEPES pH7.5-8.0；蛋白质溶液浓度为10-20 mg/mL；生长温度为4℃；生长时间为3-7天。
5.一种如权利要求1-4任一制备方法获得的鸭坦布苏病毒E D III蛋白。
6.一种包含权利要求5所述鸭坦布苏病毒E D III蛋白的生物制剂。
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