[发明专利]巴氏杆菌肝素骨架合酶BtHS1及其突变体与应用有效
| 申请号： | 202110881478.X | 申请日： | 2021-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN113564139B | 公开（公告）日： | 2023-03-10 |
| 发明（设计）人： | 生举正;郭学平;孙柳;王凤山;邓建群 | 申请（专利权）人： | 山东大学;华熙生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/26;C12P19/18;C12R1/19 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人： | 陈桂玲 |
| 地址： | 250012 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 杆菌 肝素 骨架 bths1 及其 突变体 应用 | ||
1.一种巴氏杆菌肝素骨架合酶突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.5所示；是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的巴氏杆菌肝素骨架合酶氨基酸序列中第305位的丝氨酸突变为天冬酰胺或谷氨酰胺。
2.一种重组载体，其特征在于，是在质粒载体中插入权利要求1所述的巴氏杆菌肝素骨架合酶突变体的编码基因。
3.如权利要求2所述的重组载体，其特征在于，所述质粒载体为pET30a(+)。
4.一种重组菌株，其特征在于，是将权利要求3所述的重组载体转化入宿主细胞中获得。
5.如权利要求4所述的重组菌株，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌。
6.如权利要求5所述的重组菌株，其特征在于，所述大肠杆菌为大肠杆菌BL21（DE3）。
7.权利要求1所述的巴氏杆菌肝素骨架合酶突变体在合成肝素骨架中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用是以UDP-GlcNAc作为供体底物，GlcA-pNP作为受体底物，催化反应生成结构为GlcNAc-GlcA-pNP的肝素骨架。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用是以UDP-GlcA作为供体底物，GlcNAc-GlcA-pNP作为受体底物，催化反应生成结构为GlcA-GlcNAc-GlcA-pNP的肝素骨架。
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