[发明专利]蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C原核表达载体、重组菌株及其应用

权利要求书

1.蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C原核表达载体或表达蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的重组菌株制备的蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C在制备蜱传脑炎病毒感染血清学检测用试剂中的应用；编码蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C原核表达载体或重组菌株制备的蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C在制备诊断蜱传脑炎的试剂盒中的应用；编码蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括ELISA检测试剂。

4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C原核表达载体包括初始载体和编码蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的基因。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述编码蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的基因连接在载体pET-32a(+)的BamHⅠ和SalⅠ酶切位点之间。

6.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，表达蜱传脑炎病毒衣壳蛋白的重组菌株通过将蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C原核表达载体转化宿主细胞感受态获得；所述蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C原核表达载体包括初始载体和编码蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的基因；所述编码蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的基因连接在载体pET-32a(+)的BamHⅠ和SalⅠ酶切位点之间。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述宿主细胞包括大肠杆菌BL21(DE3)。

8.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的制备方法，包括以下步骤：

1)以森林脑炎病毒总RNA反转录后的cDNA为模板，进行PCR扩增获得编码蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的基因；

2)将扩增获得的编码蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C的基因插入到载体pET-32a(+)的BamHⅠ和SalⅠ酶切位点之间获得原核表达载体；

3)将所述原核表达载体转入宿主细胞进行诱导表达获得蜱传脑炎病毒衣壳蛋白C。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，步骤1)中所述PCR扩增所用的引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。