[发明专利]一种X染色体STR基因座的复合扩增体系及试剂盒有效
申请号: | 202110884163.0 | 申请日: | 2021-08-03 |
公开(公告)号: | CN113403406B | 公开(公告)日: | 2021-11-23 |
发明(设计)人: | 刘超;赵鹏;杜蔚安;刘宏;朱卓英;郑阳阳;梅兴林;杨幸怡;周咏松;麦琴笑 | 申请(专利权)人: | 广东华美众源生物科技有限公司;无锡中德美联生物技术有限公司;广州市刑事科学技术研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 朱继超 |
地址: | 528000 广东省佛山市禅城*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 染色体 str 基因 复合 扩增 体系 试剂盒 | ||
1.一种X染色体STR基因座的复合扩增体系,其特征在于,包括特异性复合扩增32个X染色体STR基因座和1个Amelogenin性别识别基因座的33对引物对,所述X染色体STR基因座选自DXS8378、DXS7423、DXS10148、DXS10159、DXS10134、DXS7424、DXS9902、DXS10162、DXS7132、DXS10079、DXS6789、GATA165B12、DXS101、DXS10075、DXS10103、DXS10101、HPRTB、DXS6809、GATA31E08、GATA172D05、DXS6803、DXS10074、DXS10135、DXS6810、DXS6795、DXS6800、DXS7133、DXS10164、DXS6807、DXS9895、DXS8377及DXS981;33对所述引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO. 1至SEQ ID NO. 66所示,各引物的终浓度按SEQ ID NO. 1至SEQID NO. 66依次为0.06μM、0.06μM、0.08μM、0.08μM、0.11μM、0.11μM、0.08μM、0.08μM、0.10μM、0.10μM、0.13μM、0.13μM、0.07μM、0.07μM、0.11μM、0.11μM、0.11μM、0.11μM、0.34μM、0.34μM、0.12μM、0.12μM、0.06μM、0.06μM、0.29μM、0.10μM、0.16μM、0.16μM、0.21μM、0.21μM、0.20μM、0.20μM、0.13μM、0.13μM、0.13μM、0.13μM、0.22μM、0.07μM、0.16μM、0.05μM、0.11μM、0.11μM、0.10μM、0.10μM、0.34μM、0.13μM、0.16μM、0.16μM、0.02μM、0.02μM、0.61μM、0.20μM、0.40μM、0.40μM、0.45μM、0.45μM、0.05μM、0.05μM、1.50μM、0.50μM、0.47μM、0.16μM、0.16μM、0.49μM、0.10μM、0.31μM;每个所述基因座对应的引物对中至少有一个引物的5'端具有荧光染料标记,特异性复合扩增DXS8378、DXS7423、DXS10148、DXS10159和DXS10134基因座的引物对为第一组,特异性复合扩增DXS7424、DXS9902、DXS10162、DXS7132、DXS10079和DXS6789基因座的引物对为第二组,特异性复合扩增GATA165B12、DXS101、DXS10075、DXS10103、DXS10101、HPRTB和DXS6809基因座的引物对为第三组,特异性复合扩增GATA31E08、GATA172D05、DXS6803、DXS10074、DXS10135和DXS6810基因座的引物对为第四组,特异性复合扩增Amelogenin、DXS6795、DXS6800、DXS7133、DXS10164、DXS6807、DXS9895、DXS8377和DXS981基因座的引物对为第五组,每组具有相同的荧光染料标记,各组的荧光染料标记互不相同。
2.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,所述荧光染料标记选自6-FAM、HEX、TAMRA、ROX、VIC、PET、NED、TAZ或SIZ。
3.根据权利要求2所述的复合扩增体系,其特征在于,所述第一组的荧光染料标记为6-FAM,所述第二组的荧光染料标记为HEX,所述第三组的荧光染料标记为SUM,所述第四组的荧光染料标记为LYN,所述第五组的荧光染料标记为PUR。
4.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,包括反应混合液10.0 μL,热启动Taq酶1.0 μL,33对所述引物对的混合物5.0 μL和适量 sdH2O;所述反应混合液包括Tris-HCl、MgCl2、KCl和dNTP、BSA;Tris-HCl的反应终浓度为50 mM,MgCl2的反应终浓度为2.0 mM,KCl的反应终浓度为50 mM,dNTP的反应终浓度为0.2 mM,BSA的反应终浓度为0.8 mg/mL,热启动Taq酶的含量为5U/μL。
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