[发明专利]一种同时测定金银花中多种酚酸的方法

权利要求书

1.一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，其特征在于，采用超高效液相串联质谱法进行测定，

色谱条件为：色谱柱为Hola C18色谱柱，100mm×2.1mm，2.7μm，流动相为0.08％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱：0～20min，2～12％B；20～35min，12～15％B；35～45min，15～21％B；45～55min，21～24％B；55～60min，24％～80％；检测波长为254nm和327nm，流速为0.3ml/min，进样量为2μl，柱温为25±0.8℃；

质谱条件为：电喷雾电离离子源(ESI)在正负离子模式下扫描，辅助气温度为350℃，流速为8L/min，压力为35psig，喷雾电压为3000V，裂解电压为175V，扫描范围为m/z 50～800。

2.根据权利要求1所述的一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，其特征在于，其具体步骤为：

(1)供试品溶液的制备：将金银花粉碎后过四号药典筛，取药材粉末适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液，密塞，超声处理，过滤，取续滤液即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取22种金银花酚酸类成分对照品适量，精密称定，加甲醇溶解为对照品溶液，-20℃保存备用；

(3)色谱条件为：色谱柱为Hola C18色谱柱，100mm×2.1mm，2.7μm，流动相为0.08％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱：0～20min，2～12％B；20～35min，12～15％B；35～45min，15～21％B；45～55min，21～24％B；55～60min，24％～80％；检测波长为254nm和327nm，流速为0.3ml/min，进样量为2μl，柱温为25±0.8℃；

(4)质谱条件为：电喷雾电离离子源(ESI)在正负离子模式下扫描，辅助气温度为350℃，流速为8L/min，压力为35psig，喷雾电压为3000V，裂解电压为175V，扫描范围为m/z 50～800；

(5)将上述所制得的供试品溶液和混合对照品溶液，按照步骤(3)的色谱条件和步骤(4)的质谱条件进样检测，其结果在系统自带分析软件Agilent Masshunter QualitativeAnalysis Navigator B.08.00中显示，提取供试品和对照品结果中的总离子流图(TIC)、254nm及327nm处的色谱图进行鉴定，并将供试品溶液的鉴定结果与对照品溶液的结果进行保留时间、准分子离子峰及碎片离子的比对。

3.根据权利要求1所述的一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，其特征在于，步骤(1)中甲醇溶液为甲醇的水溶液，以体积比计，甲醇：水＝7:3。

4.根据权利要求3所述的一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，其特征在于，步骤(1)中药材粉末与甲醇溶液的用量比为1g/30ml。

5.根据权利要求3所述的一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，其特征在于，步骤(1)中超声处理的功率为500W，频率为40kHz，时间为1h。

6.根据权利要求3所述的一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，其特征在于，步骤(1)中用0.22μm滤膜过滤。

7.根据权利要求3所述的一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，其特征在于，步骤(2)中对照品溶液浓度均为100ug/ml的对照品溶液。

8.根据权利要求3所述的一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述22种金银花酚酸类成分为

NO.	化合物名称
1	原儿茶酸
2	1-O-咖啡酰奎宁酸
3	5-O-咖啡酰奎宁酸(新绿原酸)
4	3-(3，4-二羟基苯基)丙酸
2	绿原酸
6	咖啡酸
7	4-O-咖啡酰奎宁酸(隐绿原酸)
8	4-羟基桂皮酸
9	1，3-O-二咖啡酰基奎宁酸
10	阿魏酸
11	绿原酸甲酯
12	咖啡酸甲酯
13	1，4-O-二咖啡酰基奎宁酸
14	3，4-O-二咖啡酰奎宁酸(异绿原酸B)
15	1，5-O-二咖啡酰基奎宁酸
16	3，5-O-二咖啡酰奎宁酸(异绿原酸A)
17	4-羟基桂皮酸甲酯
18	4，5-O-二咖啡酰奎宁酸(异绿原酸C)
19	咖啡酸乙酯
20	3，4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯
21	3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯
22	4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯

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