[发明专利]一种同时测定金银花中多种酚酸的方法

说明书

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，采用超高效液相串联质谱法进行测定，色谱柱为Hola C18色谱柱，流动相为0.08％甲酸水溶液‑乙腈，梯度洗脱；检测波长为254nm和327nm，流速为0.3ml/min，进样量为2μl；电喷雾电离离子源在正负离子模式下扫描，辅助气温度为350℃，流速为8L/min，压力为35psig，喷雾电压为3000V，裂解电压为175V，扫描范围为m/z 50～800。本发明准确鉴定了金银花中酚酸类成分并得到了各成分相应的保留时间，后续研究者无需使用昂贵标准品即可根据发明提供的方法及结果进行金银花酚酸类成分的定性研究。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种同时测定金银花中多种酚酸的方法。

背景技术

金银花(Lonicera japonica Flos)为传统中药，其价值高、用途广，常用于疏散风热和清热解毒。金银花的有效活性成分主要包括酚酸、黄酮及挥发油等，其中酚酸类成分因其良好的抗氧化活性、抗病毒、抗菌、抗炎、抗氧化和抗肿瘤等药理活性，近年来受到广泛关注。此外，2020版《中国药典》也提高了对于金银花酚酸类成分的含量要求，因此酚酸类成分作为金银花的主要成分亟待深入研究。

随着近年来天然化合物分离及结构鉴定技术水平迅速提升，在金银花中有越来越多的酚酸类成分被相继发现，虽已有研究者对金银花所含绿原酸等主要酚酸类成分进行了定性定量研究，但微量酚酸类成分在金银花中的鉴定却研究甚少，且金银花酚酸类成分存在同分异构体较多的情况，因此即便结合质谱进行检测，也难以通过分子量确定其成分名称，这不利于金银花资源的开发及其有效成分的进一步研究。

发明内容

针对上述问题，本发明提出了一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，可以同时对金银花中22中分酸类成分进行测定。

本发明所述的一种同时测定金银花中多种酚酸的方法，采用超高效液相串联质谱法进行测定，

色谱条件为：色谱柱为Hola C18色谱柱，100mm×2.1mm，2.7μm，流动相为0.08％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱：0～20min，2～12％B；20～35min，12～15％B；35～45min，15～21％B；45～55min，21～24％B；55～60min，24％～80％；检测波长为254nm和327nm，流速为0.3ml/min，进样量为2μl，柱温为25±0.8℃；

质谱条件为：电喷雾电离离子源(ESI)在正负离子模式下扫描，辅助气温度为350℃，流速为8L/min，压力为35psig，喷雾电压为3000V，裂解电压为175V，扫描范围为m/z 50～800。

其具体步骤为：

(1)供试品溶液的制备：将金银花粉碎后过四号药典筛，取药材粉末适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液，密塞，超声处理，过滤，取续滤液即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取22种金银花酚酸类成分对照品适量，精密称定，加甲醇溶解为对照品溶液，-20℃保存备用；

(3)色谱条件为：色谱柱为Hola C18色谱柱，100mm×2.1mm，2.7μm，流动相为0.08％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱：0～20min，2～12％B；20～35min，12～15％B；35～45min，15～21％B；45～55min，21～24％B；55～60min，24％～80％；检测波长为254nm和327nm，流速为0.3ml/min，进样量为2μl，柱温为25±0.8℃；

(4)质谱条件为：电喷雾电离离子源(ESI)在正负离子模式下扫描，辅助气温度为350℃，流速为8L/min，压力为35psig，喷雾电压为3000V，裂解电压为175V，扫描范围为m/z50～800；