[发明专利]一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片及其制备方法

权利要求书

1.一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片，其特征在于：其制备方法包括如下步骤：

(1)黑玻片预处理：将黑玻片置于玻片预处理液中浸泡一定时间，之后采用纯化水对浸泡后的黑玻片进行清洗，然后将黑玻片置于硅烷溶液中浸泡一定时间，最后将浸泡好的黑玻片氮气吹扫后放入烘箱中烘烤；

(2)蛋白溶液点样：采用机器自动化点样采用机器自动化点样nRNP抗原、Smith抗原、SSA抗原和SSB抗原；

(3)封闭工艺，制得所述蛋白芯片：将点样好的黑玻片没入封闭液中，之后取出黑玻片，并离心去除残余封闭液，制得蛋白芯片；

(4)试剂盒制备：将步骤(3)中的蛋白芯片与标记有HRP酶的第二抗体溶液、检测液A和检测液B(1％过氧化氢)共同包装成试剂盒。

2.根据权利要求1所述的一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，所述预处理液为2％氢氧化钠，所述黑玻片的浸泡时间为16-24小时，所述纯化水的清洗次数为2-8次。

3.根据权利要求1所述的一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，所述硅烷溶液的质量浓度为0.05-1％，所述黑玻片在硅烷溶液中的浸泡时间为20-60分钟，所述黑玻片的烘烤温度为100-180摄氏度，且烘烤时间为0.2-0.6小时。

4.根据权利要求1所述的一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，各个抗体溶液浓度为0.1mg/m L，每点点样20n L。

5.根据权利要求1所述的一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，封闭液为内含2％卵清蛋白的PBS缓冲液，所述黑玻片没入封闭液的时间为24小时。

6.根据权利要求1所述的一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中，标记有HRP酶的第二抗体溶液的成分为浓度为1ug/ml，其中介质为酶标二抗稀释液，pH＝6.0。

7.根据权利要求1所述的一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中，检测液A的成分为含1％鲁米诺和2％Tris。

8.根据权利要求1所述的一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中，检测液B的成分为1％过氧化氢。