[发明专利]一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片及其制备方法

说明书

本发明专利公开了一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片及其制备方法，其制备方法包括如下步骤：(1)黑玻片预处理：将黑玻片置于玻片预处理液中浸泡一定时间，本发明专利通过开发的蛋白芯片技术可实现多标志物联合检测，可以一次性测定多个指标，有效地提高检测效率，实现定量检测、降低检测成本，且该方法具有灵敏度高、特异性好、全自动化程度高、应用范围广等优点，并且本发明蛋白芯片用于干燥综合征自身标志物抗体，该技术实现联合检测可以有效地提高检测效率，降低检测成本，而且本发明开发了同时包含有nRNP、Smith、SSA、Ro‑52、SSB 5个指标在内的蛋白芯片诊断试剂盒，具有快速，高效，低成本等优点，因此非常值得推广。

技术领域

本发明专利涉及医疗用品技术领域，具体为一种用于自身免疫抗体检测的蛋白芯片及其制备方法。

背景技术

自身免疫性疾病是免疫系统对自身机体的成份发生免疫反应，造成损害而引发的疾病。正常情况下，免疫系统只对侵入机体的外来物，如细菌、病毒、寄生虫以及移植物等产生反应，消灭或排斥这些异物。在某些因素影响下，机体的组织成份或免疫系统本身出现了某些异常，致使免疫系统误将自身成份当成外来物来攻击。这时候免疫系统会产生针对机体自身一些成份的抗体及活性淋巴细胞，损害破坏自身组织脏器，导致疾病。如果不及时有效的加以控制，其后果十分严重：免疫系统的攻击会影响每个人体器官，且通常会终身对其进行攻击；有时还可能同时对身体众多部位造成损伤。早期诊断对管理自免来说非常重要，在早期阶段发现可避免或延迟目标器官或组织发生无法补救的损伤。原发性干燥综合征(PSS)是一种以病及外分泌腺为主的弥漫性结缔组织病。表现为干燥性角、结膜炎，口腔干燥症，还可累及肺肾二脏及神经系统等。PSS的诊断依赖于实验室血清学检查、泪腺功能检测，唇腺活检可以明确诊断。本病与其他科室许多临床表现相似，诊断与治疗时需多加以鉴别。进一步认识本病可提高确诊率，正确评估预后，积极治疗和缓解病情具有重要意义。PSS患者血清中可存在各种自身抗体，对疾病的发生发展、临床诊断与治疗、病程转归与预后均发挥着至关重要的作用。现将PSS相关的主要自身抗体临床意义归纳如下：

抗nRNP抗体(尿嘧啶1-低分子量核糖核蛋白)

该抗体主要识别的是核心蛋白A、C及70KD的U1-nRNP。高滴度的抗U1-nRNP抗体为夏普综合征的特征性标志。夏普综合征为多症状多表型的混合结缔组织病，合并有类风湿性关节炎、SLE、系统性硬化症及多肌炎的临床特征，到目前为止尚未被定义为一种单独及疾病。抗体的滴度与疾病的活动性相关。

抗Smith抗体

Sm，Smith抗原是以患者的编号命名，小核糖蛋白组，参与mRNA前体(pre-mRNA)的剪切，组分包含有尿嘧啶的RNA(U-RNA)及各种蛋白，分子量为9-70KD。抗Smith抗体对SLE高度特异，同抗dsDNA抗体一起都被认为是参与疾病的致病过程，白人患者的Sm抗体阳性率较低，其他族群抗体阳性率高。

抗SSA(Ro)抗体及抗Ro-52抗体

可溶性物质A，或干燥综合征A或Robert抗原，以患者的编号命名，细胞浆蛋白复合体包含一个Y1-，Y2-，Y3-，Y4-或Y5-RNA分子及一个蛋白亚单位。抗SSA抗体识别60KD亚单位，与各种自身免疫疾病相关。最常见于干燥综合征，也可见于SLE及原发性胆汁硬化症，偶见于自身免疫肝炎及病毒性肝炎。除此之外，抗SSA抗体特别见于新生儿红斑狼疮，又称新生儿SLE综合征，当母亲为SSA抗体阳性，且抗SSB存在时，抗体可通过胎盘进如胎儿体内，导致炎症反应及先天性AV闭锁。抗SSA抗体与抗Ro52抗原(52KD蛋白，RING依赖E3连接酶)的相互鉴别在诊断上十分关键，因为Ro52抗体不具备疾病特异性，也可在肌炎、系统性硬化症、其他胶原病、新生儿SLE、原发性胆汁性肝硬化、自身免疫性肝炎及病毒性肝炎中检测出该抗体。

抗SSB抗体