[发明专利]NDSEV中IL-6作为用于诊断和/或治疗蛛网膜下腔出血症的标志物在审
申请号: | 202110887631.X | 申请日: | 2021-08-03 |
公开(公告)号: | CN113588968A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 赖年升;姚阳;江晓春;李真保;方兴根;吴德刚;赵心同;夏大勇;袁金龙 | 申请(专利权)人: | 皖南医学院第一附属医院(皖南医学院弋矶山医院) |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人: | 胡乐 |
地址: | 241001 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | ndsev il 作为 用于 诊断 治疗 蛛网膜 出血 标志 | ||
1.NDSEV中IL-6作为用于诊断和/或治疗蛛网膜下腔出血症的标志物。
2.如权利要求1所述的用于诊断和/或治疗蛛网膜下腔出血症的标志物,其特征在于,
所述NDSEV来源于血浆。
3.如权利要求2所述的用于诊断和/或治疗蛛网膜下腔出血症的标志物,其特征在于,
所述血浆的分离过程为:
将待测血液在抽取后2小时内用EDTA抗凝管进行血浆分离,4℃条件下,500转/min离心10min,然后将上层清液转移到EP管中,3000转/min离心10min,得到血浆。
4.如权利要求3所述的用于诊断和/或治疗蛛网膜下腔出血症的标志物,其特征在于,
所述NDSEV提取过程为:
使用小囊泡提取试剂盒提取SEV,将400μL沉淀缓冲液B加入1ml血浆样品中,4℃下混合60min,然后室温条件下以10,000g继续离心30min,然后通过除去上清液来收获SEV,将SEV重悬于100μL重悬缓冲液中,通过用小鼠抗人CD171生物素化抗体免疫吸附富集来收集总NDSEV,加入预处理的protein A琼脂糖珠使目的抗体与protein A琼脂糖珠偶连,免疫沉淀反应后将琼脂糖珠离心至管底,弃上清,琼脂糖珠用含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂混合物的1%Triton X-100裂解缓冲液裂解得到含有CD171蛋白的NDSEV。
5.用于检测权利要求1所述的NDSEV中IL-6的抗体在制备诊断蛛网膜下腔出血症的试剂盒的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,
所述试剂盒用于提供在患有或有风险形成蛛网膜下腔出血症的患者中诊断蛛网膜下腔出血症,预测形成蛛网膜下腔出血症的风险,或预测蛛网膜下腔出血症的结果。
7.如权利要求5所述的应用,其特征在于,
所述抗体用于测定样品中所述NDSEV中IL-6的表达水平。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,
所述NDSEV中IL-6的表达水平是患者的NDSEV中IL-6的表达水平与健康对照人的NDSEV中IL-6表达水平为参照。
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