[发明专利]一种鉴定棉花叶蜜腺性状的InDel标记引物及其应用有效
申请号: | 202110889018.1 | 申请日: | 2021-08-04 |
公开(公告)号: | CN113373260B | 公开(公告)日: | 2022-08-02 |
发明(设计)人: | 杨召恩;胡伟;王鹏;秦文强;李付广 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州中鼎万策专利代理事务所(普通合伙) 41179 | 代理人: | 黄照倩 |
地址: | 455112*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 棉花 蜜腺 性状 indel 标记 引物 及其 应用 | ||
1.一种鉴定棉花叶蜜腺性状的InDel标记引物,其特征在于,所述InDel标记引物包括引物NEC1-F和引物NEC1-R,引物NEC1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.2,引物NEC1-R的核苷酸序列SEQ ID NO.3所示。
2.一种如权利要求1所述的InDel标记引物在棉花分子标记辅助育种中的应用。
3.一种如权利要求1所述的InDel标记引物在选育棉花有/无叶蜜腺品种中的应用。
4.一种鉴定棉花叶蜜腺性状的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取待测棉花的基因组DNA;
(2)以提取的DNA为模板,利用权利要求1所述引物进行PCR扩增;
(3)对PCR扩增产物进行电泳;
(4)根据电泳结果,鉴定棉花叶蜜腺性状。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR扩增的反应体系为:2×Gflex PCRBuffer含Mg2+ dNTPs 25μl、10mM引物NEC1-F 2μl、10mM引物 NEC1-R 2μl、500ng/μl模板DNA1.5 μl、5U/μl TKS Gflex DNA Polymerase 1μl、H2O 18.5 μl。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR扩增的反应程序为:94℃预变性10min;98℃变性20s,52℃退火25s,68℃延伸25s,运行35个循环;最后68℃延伸10min,4℃保存。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,鉴定棉花叶蜜腺性状的标准为:当PCR扩增片段为一个,且片段大小为339bp,则待测棉花为有叶蜜腺材料;当PCR扩增片段为一个,且片段大小为344bp,则待测棉花为无叶蜜腺材料;当PCR扩增片段为两个,且片段大小分别为339bp和344bp,则待测棉花为有叶蜜腺材料。
8.一种鉴定棉花叶蜜腺性状的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述引物。
9.一种如权利要求8所述试剂盒在棉花分子标记辅助育种中的应用。
10.一种如权利要求8所述试剂盒在选育棉花有无叶蜜腺品种中的应用。
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