[发明专利]一种鉴定棉花叶蜜腺性状的InDel标记引物及其应用有效

专利信息
申请号: 202110889018.1 申请日: 2021-08-04
公开(公告)号: CN113373260B 公开(公告)日: 2022-08-02
发明(设计)人: 杨召恩;胡伟;王鹏;秦文强;李付广 申请(专利权)人: 中国农业科学院棉花研究所
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司: 郑州中鼎万策专利代理事务所(普通合伙) 41179 代理人: 黄照倩
地址: 455112*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 一种 鉴定 棉花 蜜腺 性状 indel 标记 引物 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种鉴定棉花叶蜜腺性状的InDel标记引物,其特征在于,所述InDel标记引物包括引物NEC1-F和引物NEC1-R,引物NEC1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.2,引物NEC1-R的核苷酸序列SEQ ID NO.3所示。

2.一种如权利要求1所述的InDel标记引物在棉花分子标记辅助育种中的应用。

3.一种如权利要求1所述的InDel标记引物在选育棉花有/无叶蜜腺品种中的应用。

4.一种鉴定棉花叶蜜腺性状的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)提取待测棉花的基因组DNA;

(2)以提取的DNA为模板,利用权利要求1所述引物进行PCR扩增;

(3)对PCR扩增产物进行电泳;

(4)根据电泳结果,鉴定棉花叶蜜腺性状。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR扩增的反应体系为:2×Gflex PCRBuffer含Mg2+ dNTPs 25μl、10mM引物NEC1-F 2μl、10mM引物 NEC1-R 2μl、500ng/μl模板DNA1.5 μl、5U/μl TKS Gflex DNA Polymerase 1μl、H2O 18.5 μl。

6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR扩增的反应程序为:94℃预变性10min;98℃变性20s,52℃退火25s,68℃延伸25s,运行35个循环;最后68℃延伸10min,4℃保存。

7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,鉴定棉花叶蜜腺性状的标准为:当PCR扩增片段为一个,且片段大小为339bp,则待测棉花为有叶蜜腺材料;当PCR扩增片段为一个,且片段大小为344bp,则待测棉花为无叶蜜腺材料;当PCR扩增片段为两个,且片段大小分别为339bp和344bp,则待测棉花为有叶蜜腺材料。

8.一种鉴定棉花叶蜜腺性状的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述引物。

9.一种如权利要求8所述试剂盒在棉花分子标记辅助育种中的应用。

10.一种如权利要求8所述试剂盒在选育棉花有无叶蜜腺品种中的应用。

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