[发明专利]一种富含麦角硫因和烟酰胺的蕈菌提取液的制备方法

说明书

本发明公开了一种富含麦角硫因和烟酰胺的蕈菌提取液的制备方法。本发明的制备方法包括：在一定量的蕈菌冻干燥粉中加入细胞表面展示的壳聚糖酶、维生素C以及蒸馏水，控制提取温度在40‑60℃，pH值控制在5.5‑6.5；提取结束后，利用过滤或离心除去蕈菌残渣，对收集的滤液进一步微滤和超滤除掉表面展示的壳聚糖酶，并进行滤液的无菌检测。本发明通过非高温处理蕈菌的方式获得的提取液，富含麦角硫因和烟酰胺等抗氧化与抗炎活性物，可作为化妆品原料，达到抗氧化、抗炎及抗敏等护肤效果。

技术领域

本发明涉及一种富含麦角硫因和烟酰胺的蕈菌提取液的制备方法，属于生物技术领域。

背景技术

蕈菌是一类肉眼可见的大型真菌子实体，大多数属于担子菌亚门，食用蕈菌主要包括蘑菇属、木耳属、虫草属、灵芝属等，糙皮侧耳、猴头菇和杏鲍菇等属于常见食用蕈菌，它们的子实体有伞盖、伞柄等厚壁细胞组成。通过GC-MS、LC-MS以及光谱数据分析鉴定，这些蘑菇属的食用蕈菌含有人体不能自身合成的抗氧化物，如麦角硫因，此外也含有丰富的烟酰胺和麦角甾醇等活性物质。

1909年，有学者在研究麦角真菌Claviceps purpurea时分离出一种独特的白色结晶含硫化合物，后来被确定为2-硫基-L-组氨酸三甲基内盐，随后其被命名为麦角硫因(ergothioneine，EGT)，麦角硫因是一种无味、无色化合物，分子式为C₉H₁₆N₃O₂S，25℃时水溶解度极限值为0.9mol/L，分子结构中含有咪唑-2-硫酮基团。目前麦角硫因已经被收录到我国颁布的化妆品原料目录，成为清除氧自由基的重要抗氧化活性物。

人体和动物机体自身不能合成麦角硫因，只能从食物中摄取并积累在组织和细胞中。麦角硫因具有很强的抗氧化性，在机体内扮演着重要的角色。随着人们对抗氧化剂研究的不断深入，麦角硫因作为一种天然的生物活性物质受到人们广泛的关注，国外已有相关报道。

蕈菌中的糙皮侧耳、猴头菇和杏鲍菇等常见食用菌中麦角硫因的含量高且具有天然安全性，是制备麦角硫因的优良原料。目前，国内外对麦角硫因的研究多集中于抗氧化与抗炎等的活性功能研究。提取方面的报道一般为水或溶剂(如乙醇)对常见食用菌的简单浸提。由于麦角硫因易被氧化，其提取得率会受溶剂、温度等因素的影响很大。采用超声、微波破壁技术等物理手段虽然可以改善麦角硫因的提取得率，但在产热容易造成提取液的温度波动，破坏麦角硫因的稳定，同时这些方法在工业化生产的过程中存在放大难度以及高能耗等问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：目前提取蕈菌中活性成分的方法存在活性产物得率低、成本高等问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种富含麦角硫因和烟酰胺的蕈菌提取液的制备方法，包括：在蕈菌冻干燥粉中加入细胞表面展示的壳聚糖酶、维生素C以及蒸馏水，控制温度在40-60℃、pH值在5.5-6.5的条件下进行酶解提取，然后过滤和离心除去蕈菌残渣，收集滤液，进一步微滤和超滤除掉表面展示的壳聚糖酶，得到蕈菌提取液。

优选地，所述的细胞表面展示的壳聚糖酶的制备方法是参考申请号为201810382811.0的专利中的方法。

优选地，所述的蕈菌包括糙皮侧耳、猴头菇和杏鲍菇中的至少一种。

优选地，所述的蕈菌冻干燥粉、维生素C以及蒸馏水的比例为30～50g：0.02～0.06g：500mL。

优选地，所述酶解提取的时间为4～6h。

优选地，所述的离心的条件为：离心转速3000～5000转/分钟，离心时间5～20分钟。

优选地，所述的微滤采用0.22μm的滤膜，所述的超滤采用1KDa的滤膜。