[发明专利]医药黄腐酸标准品制造及其细胞实验的应用

权利要求书

1.一种医药黄腐酸标准品的制造方法，其特征在于：包括以下制造步骤：，

(1)泥炭、褐煤、风化煤原料先在反应器温度30-150℃，反应时间1.0-3.5h，反应压力0.10MPa-0.15MPa下催化氧化后，沉淀分离，除去医药黄腐酸的不溶性杂质。。

(2)采用FX100370X1070立式旋流机、LW255X765-NLWX020-N卧螺式分离机、DHC300碟式离心机再进行多级液固分离，去除医药黄腐酸不溶性的细微杂质，有效率分别为50-75％，75-90％，91.0-95.0％。

(3)运用0.0001-0.05％的壳聚糖，在温度20-50℃，时间0.5-1h，压力0.10-0.12MPa进行凝胶水解相变法脱灰，有效率达96.0-98.5％后为粗制的黄腐酸医药品。

2.根据权利要求1所述的制造方法，其特征在于：催化剂为过碳酸钠、过碳酸钾、过碳酸钙、过氧化氢中的一种或二种，催化剂浓度为原料的0.1-0.01％(质量)。

3.根据权利要求1所述的(1)、(2)、(3)制造方法，其特征在于：粗制的黄腐酸医药品，又在温度20-50℃，压力0.10-0.12MPa下，采用水渗析膜、10-30：70-90％(质量)醇水渗析膜、均相和异相的电渗析膜连续脱盐，采用凝胶色谱法(GPC)测定分子量在380-500Da，使精制的黄腐酸医药品纯度达到99.00-99.99％。

4.根据权利要求1、2、3所述的医药黄腐酸，用Hep1-3B转氨酶细胞的实验验证，其特征在于：

用25％乙醇处理Hep1-3B细胞，在转氨酶标准曲线的上，实验确定黄腐酸在50ug/ml的浓度下，对转氨酶细胞的抑制率超过55％,在200ug/ml的浓度下抑制率达70％-90％。

5.根据权利要求1、2、3所述的医药黄腐酸标准品，用于α-葡萄糖苷酶细胞的实验验证，其特征在于：当PNPG与半乳糖结合形成一种乳糖、葡萄糖衍生物时，黄腐酸对胰腺抵抗降血糖的作用，在空白对照和黄腐酸药物浓度为12.5ug/ml、25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml。

6.根据权利要求1、2、3所述的医药黄腐酸标准品，用于胶质瘤U87细胞的存活率，其特征在于：与空白对照组比较12.5ug/ml、25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml黄腐酸药物在*，p0.05,**，p0.01,***，p0.001具有显著性，半数抑制浓度为35.28％以上。

7.根据权利要求1、2、3、6所述的其特征在于，在12.5ug/ml、25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml时，医药黄腐酸也能调节血脑屏障的通透性，预防脑炎症、脑肿瘤、脑卒中的发生。