[发明专利]一种重组SGLT2蛋白及其应用

说明书

本发明提供了一种重组SGLT2蛋白及其应用，所述重组SGLT2蛋白包括SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明还提供了一种核酸分子、一种重组质粒、一种重组病毒、一种重组细胞以及所述重组SGLT2蛋白的制备方法。所述重组SGLT2蛋白具有良好的折叠以及翻译后加工的水平，与天然状态下的蛋白十分接近，生物活性好，稳定性高，水溶性好；所述重组SGLT2蛋白的制备方法技术成熟，成功率高，容易掌握，重组蛋白的产量高，纯化效果好，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于重组蛋白技术领域，尤其涉及一种重组SGLT2蛋白及其应用。

背景技术

糖尿病是一种非常普遍的慢性代谢性疾病，主要表现症状为高血糖，是影响人类生活的重大疾病之一。葡萄糖流经肾脏时，90％以上的葡萄糖将被重吸收，回到血液循环中。在生物体内，葡萄糖必须借助于细胞膜上的葡萄糖转运蛋白才能自由通过细胞膜的脂质双分子层。

钠依赖的葡萄糖运载体(SGLTs)是一类在小肠黏膜和肾脏近曲小管中发现的转运蛋白家族，肾脏重吸收葡萄糖的过程主要由SGLTs介导，其中，SGLT1和SGLT2最为重要。SGLT1是一种高亲和力低效能的转运蛋白，且不具有葡萄糖特异性。SGLT2负责将肾小球滤过的约90％的葡萄糖重新吸收回血液中，是一种低亲和力高转运能力的葡萄糖转运蛋白。

针对SGLT2靶点的药物不仅能有效抑制肾小管重吸收葡萄糖、促进葡萄糖从尿液中排出，达到降低血糖目的，还不会增加低血糖发生的风险，可改善血压及体重。同时还有研究发现，其可以降低心血管和终末期肾脏疾病的风险，以及延缓慢性肾脏疾病的进程，具有肾脏保护作用。

选择性地抑制SGLT2蛋白活性、不依赖于胰岛素分泌的降糖途径，为糖尿病的治疗提供了一条新的途径，成为降糖药物研究的热点。因此，体外获取高纯度且稳定的SGLT2蛋白是药物筛选以及疾病机理研究等相关工作的基础。目前，SGLT2蛋白体外表达的工作中往往存在蛋白产量低、修饰程度较低、稳定性较差以及操作困难等弊端。

如何提供一种操作简单、效率高、稳定性好的SGLT2蛋白的表达以纯化方法，已成为亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种重组SGLT2蛋白及其应用，通过在SGLT2蛋白的N端添加麦芽糖结合蛋白，增加了重组蛋白的表达量和水溶性，稳定性也得以提升，且为蛋白的后续纯化提供了方便。

为达此目的，本发明采用如下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种重组SGLT2蛋白，所述重组SGLT2蛋白包括SEQ IDNo.1所示的氨基酸序列。

SEQ ID No.1：