[发明专利]一种靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体及其制备方法与用途

说明书

本发明公开了一种靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体及其制备方法和用途，其中，所述靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体包括脂质体组分和BIRC6抑制剂；所述脂质体组分包括DOTAP、Chol、DPPC和DSPE‑PEG2000；所述BIRC6抑制剂为靶向BIRC6的siRNA，所述靶向BIRC6的siRNA序列为GUUUCAAAGCAGGAUGAUGdTdT。本发明提供的siRNA核酸脂质体表面带正电性，不易被核酸酶降解，能够使负载的siRNA进入细胞靶向性沉默BIRC6基因，并能有效抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖和肿瘤形成，达到治疗三阴性乳腺癌的目的。本发明siRNA核酸脂质体具备良好的细胞摄取和溶酶体逃逸能力，具有BIRC6靶向性，有利于基因药物在体内的靶向运输，实现基因药物体内长循环和对BIRC6高表达肿瘤的靶向沉默效果。

技术领域

本发明涉及药物递送技术领域，尤其涉及一种靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体及其制备方法与用途。

背景技术

三阴性乳腺癌(Triple-negative breast cancer,TNBC)特指ER、PgR表达缺失以及HER2过表达或基因扩增缺失的乳腺癌类型，占全部乳腺癌的12％-17％。与其他亚型相比，TNBC生物学上更具侵袭性，患者的复发率更高，5年预后更差。尽管PARP抑制剂，PD-L1抗体atezolizumab目前已被分别批准用于BRCA突变、PD-L1表达阳性的TNBC患者，但针对TNBC的靶向治疗尚处于早期，化疗仍是标准治疗方法。TNBC患者尽管对化疗具有一定的反应率，但是仍有60％-70％的病人对化疗不敏感。因此，急需鉴定更多可用于TNBC治疗的分子靶点并研发相应的靶向治疗手段。

BIRC6是凋亡抑制蛋白(IAP)家族中分子量极大(接近530kDa)和研究较少的成员。我们前期研究发现BIRC6在三阴性乳腺癌中高表达，该过表达能够促进三阴性乳腺癌细胞增殖，并且与三阴性乳腺癌病人短的预后生存时间有关，揭示沉默BIRC6表达有望用于三阴性乳腺癌治疗。

目前，临床上尚没有沉默BIRC6表达的抑制剂。使用siRNA进行基因治疗可以下调癌细胞中异常基因的表达并在癌症治疗中显示出较大的潜力。然而，未经修饰的siRNA易被核酸酶降解、细胞摄取效率差，临床应用受到限制。目前还没有将siRNA沉默BIRC6基因用于三阴性乳腺癌等治疗药物中的研究。

因此，现有技术还有待于改进和发展。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体及其制备方法与用途。

本发明的技术方案如下：

一种靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体，其中，包括脂质体组分和BIRC6抑制剂；所述脂质体组分包括DOTAP、Chol、DPPC和DSPE-PEG2000；所述BIRC6抑制剂为靶向BIRC6的siRNA，所述靶向BRIC6的siRNA序列为GUUUCAAAGCAGGAUGAUGdTdT。

所述靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体，其中，所述脂质体组分按重量份计包括70份的DPPC，0-20份的DOTAP、5份的Chol和5份DSPE-PEG2000。

所述靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体，其中，所述脂质体组分和BIRC6抑制剂的质量比为10-100:1。

所述靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体，其中，所述脂质体组分和BIRC6抑制剂的质量比为60:1。

一种靶向BIRC6基因的siRNA核酸脂质体的制备方法，其中，包括步骤：

将DPPC、DOTAP、Chol和DSPE-PEG2000溶解于乙醇中，且在60℃的水浴中加热，得到乙醇相溶液；