[发明专利]一种稳定同位素标记硝西泮内标试剂的制备方法

权利要求书

1.一种稳定同位素标记硝西泮内标试剂的制备方法，该稳定同位素标记硝西泮内标试剂的化学结构如式(Labeled-Nitrazepam)所示：

其中R为H或D，*为¹²C或¹³C，其特征在于，其制备步骤总路线为：

其中X和Y分别为Cl、Br、I中的一种，制备步骤如下：

(1)在催化剂、配体、添加剂、有机溶剂存在条件下，加入稳定同位素标记苯硼酸，然后加入2-氨基-5-硝基苯甲腈，在30℃～120℃条件下，反应12～48小时；TLC跟踪反应原料反应完全后，反应混合溶液用水淬灭，过滤，滤液用有机溶剂萃取，合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，加入干燥剂干燥，减压蒸馏除去溶剂，残留物经柱层析得到稳定同位素标记2-氨基-5-硝基二苯甲酮；

该步骤反应如下所示：

其中稳定同位素标记苯硼酸的化学结构如式(I)所示，稳定同位素标记2-氨基-5-硝基二苯甲酮的化学结构如式(II)所示，其中R为H或D，*为¹²C或¹³C；

(2)将稳定同位素标记2-氨基-5-硝基二苯甲酮溶于有机溶剂中，加入卤乙酰卤，在20℃～80℃条件下，反应1～10小时；TLC跟踪反应原料反应完全后，反应混合溶液用水淬灭，过滤，滤液用有机溶剂萃取，合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，加入干燥剂干燥，减压蒸馏除去溶剂，残留物经柱层析得到稳定同位素标记2-氯乙酰胺基-5-硝基二苯甲酮；

该步骤反应如下所示：

其中稳定同位素标记2-氯乙酰胺基-5-硝基二苯甲酮的化学结构如式(Ⅲ)所示，其中R为H或D，*为¹²C或¹³C；X和Y分别为Cl、Br、I中的一种；

(3)将稳定同位素标记2-氯乙酰胺基-5-硝基二苯甲酮溶于有机溶剂中，加入乌洛托品和铵盐，在30℃～120℃条件下反应1-8小时；TLC跟踪反应原料反应完全后，反应混合溶液旋干，加入水，用有机溶剂萃取，合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，加入干燥剂干燥；减压蒸馏除去溶剂，残留物经柱层析得到稳定同位素标记硝西泮。

该步骤反应如下所示：

其中稳定同位素标记硝西泮的化学结构如式(Ⅳ)所示，其中R为H或D，*为¹²C或¹³C。

2.根据权利要求1所述的稳定同位素标记硝西泮内标试剂的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中，催化剂为醋酸钯、氯化钯、双(三苯基膦)二氯化钯、四(三苯基膦)钯、双(二苯基膦苯基醚)二氯化钯、双(二苯基膦二茂铁)二氯化钯、乙酰丙酮钯、三氟乙酸钯、双(二苯基磷)乙烷二氯化钯、三(二亚苄基丙酮)二钯、三(二亚苄基丙酮)二钯氯仿加合物中的一种或几种；配体为2,2’-联吡啶、4,4’-二甲基-2,2’-联吡啶、5,5’-二甲基-2,2’-联吡啶、4,4’-二甲氧基-2,2’-联吡啶、1,10-菲罗啉、4,7-二甲基-1,10-菲罗啉、4,7-二苯基-1,10-菲罗啉中的一种或几种；添加剂为盐酸、硫酸、冰醋酸、甲酸、三氟乙酸、二氯乙酸、甲烷磺酸、对甲苯磺酸、苯甲酸中的一种或几种；溶剂为四氢呋喃、二氧六环、甲苯、二甲苯、2-甲基四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、苯、氯苯中的一种或几种；稳定同位素标记的苯硼酸为氘标记的苯硼酸、¹³C标记的苯硼酸中的一种；反应温度为30℃～120℃；反应时间为12～48小时。

3.根据权利要求1所述的稳定同位素标记硝西泮内标试剂的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中，卤乙酰卤为氯乙酰氯、氯乙酰溴、溴乙酰氯、溴乙酰溴、碘乙酰氯中的一种或几种；有机溶剂为四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氧六环、苯、甲苯、二甲苯、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺中的一种或几种；20℃～80℃；反应时间为1～10小时。

4.根据权利要求1所述的稳定同位素标记硝西泮内标试剂的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中，有机溶剂为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或几种；所用铵盐为氯化铵、甲酸胺、乙酸铵、硫酸铵中的一种或几种；反应温度为30℃～120℃；反应时间为1～8小时。