[发明专利]NK细胞及其组合物在治疗癌症中的用途

权利要求书

1.特异性抑制VEGFR2的单克隆抗体和NK细胞在制备用于治疗肝癌的药盒中的用途；其特征在于，其中，所述单克隆抗体的重链可变区序列如SEQ ID NO:1所示，轻链可变区序列如SEQ ID NO:2所示；其中NK细胞采用如下的方法制备获得：将外周血2000r/min离心10min后小心吸出血浆，56℃水浴灭活30min，备用;血细胞用生理盐水稀释后加至装有Ficoll溶液的离心管中，2000r/min离心20min收集白膜层细胞并用生理盐水洗涤，计数备用；用GT-T551H3培养基将2×10⁷个PBMCs重悬后，接入T75细胞培养瓶，然后向体系中加入IL-2、白藜芦醇、NK滋养细胞及自体血浆，其中，IL-2为500U/mL、白藜芦醇终浓度为2μmol／L、滋养细胞为1×10⁶mL ^-1，血浆体积为5%，37℃5%CO₂条件下体外共培养15d，其中培养第7天时补加一次NK扩增滋养细胞，补加的NK扩增滋养细胞的数量为NK细胞数量的1/4；培养过程中每天对NK细胞观察计数，当NK细胞密度超过2.5×10⁶cells/mL补充培养基，补加的培养基为含有240U/mL IL-2的GT-T551H3培养基，补液后密度维持在1.0×10⁶cells/mL，共培养15d，收集细胞即得到高活性的NK细胞。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述药盒中还含有药学上可接受的载体。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述药盒中包含至少一种赋形剂。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于所述药盒中的赋形剂选自组氨酸，海藻糖，甘露醇，蔗糖或柠檬酸钠。

5.如权利要求3所述的用途，其特征在于所述药盒中包含缓冲液。

6.如权利要求5所述的用途，其特征在于所述药盒中的缓冲液为组氨酸，甘氨酸或磷酸缓冲液。

7.特异性抑制VEGFR2的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区序列如SEQ ID NO:1所示，轻链可变区序列如SEQ ID NO:2所示。