[发明专利]一种判断种公猪精液质量的基因检测引物及判断方法

说明书

本发明属于家畜分子生物技术领域，提供一种判断种公猪精液质量的基因检测引物、方法及种公猪精液质量候选基因的筛选方法。通过研究候选基因表达水平与精液质量指标相关性，获得种猪精液质量判断的候选基因HSF1、VDAC2和WIP1。根据候选基因信息特异性设计检测引物对，分别为候选基因HSF1基因引物对、VDAC2基因引物对和WIP1基因引物对。根据候选基因表达水平判断种公猪精液质量的方法，具有快速、准确、高效的特点，填补了本领域的空白。

技术领域

本发明属于家畜分子生物技术领域，涉及一种判断种公猪精液质量的基因检测引物及判断方法。

背景技术

猪场的经济效益在很大程度上取决于公猪的精液质量。公猪繁殖力不仅直接决定猪场的经济效益，而且影响规模化猪场母猪的繁殖性能，原精液要求必须达到规定的标准，才能保证母猪正常的受胎效果，特别人工授精和冷冻精液在当今畜禽生产中越来越普及的情况下，种公猪精液的作用越来越大。饲养公猪的目的在于产生大量品质优良的精液，并将其优良的遗传性状保留下来。但在实际生产中，公猪的精液质量具有较大的差异，利用年限普遍较短，这是制约养猪业发展的重要因素之一。

从分子方面对种公猪精液品质进行选择标记，能够更加准确和快速的对质量较好的公猪精液进行筛选，为动物繁殖育种选择时提供更有利的依据。但公猪精液质量由多基因控制，不同种公猪精液质量具有较大差异，在多种基因中筛选出合适的、具有靶向直接指标的候选基因存在较大不确定性，目前并没有针对种公猪精液质量调控基因的研究尤其是针对安徽特有品种霍寿黑猪的研究和报道。

发明内容

本发明的目的在于针对目前种公猪精液质量调控基因研究的空白，选择安徽地方种猪霍寿黑猪及国外瘦肉型猪种杜洛克和长白猪为实验动物模型，在比较霍寿黑猪和长白猪、杜洛克猪精液质量参数指标、精液质量相关基因的表达的基础上，获得霍寿黑猪与其他品种公猪精液品质的差异性及重要基因表达水平的相关性，从而得到一套判断种公猪精液质量的方法，可以为后续品种选育和新品系的建立提供参考。

本发明提供一种判断种公猪精液质量的基因检测引物，包括如下序列：

HSF1基因引物对，其正向序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2；

VDAC2基因引物对，其正向序列如SEQ ID NO.3所示，反向引物序列如SEQ ID NO.4所示；

WIP1基因引物对，其正向序列如SEQ ID NO.5所示，反向引物序列如SEQ ID NO.6所示。

本发明还提供一种判断种公猪精液质量方法，该判断方法以精子密度、顶体完整率、精子活力、精子DNA完整率、精子线粒体活性作为精液质量正向指标。

上述判断公猪精液质量方法，该方法以候选基因HSF1基因、候选基因VDAC2和候选基因WIP1基因作为精液质量标记基因。

上述种判断公猪精液质量方法，该方法根据候选基因HSF1基因表达水平判断精子密度和顶体完整率；候选基因HSF1基因分别与精子密度和顶体完整率呈正相关；候选基因HSF1基因表达水平越高，精子密度和顶体完整率越高，在其他指标相同条件下，公猪精液质量越高。

上述判断种公猪精液质量方法，该方法根据候选基因VDAC2基因表达水平判断精子活力；候选基因VDAC2基因与精子活力呈正相关；候选基因VDAC2基因表达水平越高精子活力越强，在其他指标相同条件下，公猪精液质量越高。

上述判断种公猪精液质量方法，该方法根据候选基因WIP1基因表达量判断精子活力和精子线粒体活性；候选基因WIP1基因分别与精子活力和精子线粒体活性呈负相关；候选基因WIP1基因表达水平越低，精子活力和精子线粒体活性越高，在其他指标相同条件下，公猪精液质量越高；所述公猪为霍寿黑猪。