[发明专利]与ONFH风险性有关CEBPA、PPARγ、CREBBP基因SNP检测物质及应用

说明书

本发明公开了与ONFH风险性有关CEBPA、PPARγ、CREBBP基因SNP检测物质及应用，具体为与非创伤性股骨头坏死风险性有关CEBPA、PPARγ、CREBBP基因的单核苷酸多态性的检测物质及其应用，具体涉及的单核苷酸多态性位点为rs17694108、rs3745971、rs10500264，rs2920502、rs2028759、rs3856806，rs2072381、rs9392、rs2283487、rs3751845、rs129974。本发明首次阐述了上述11SNPs与非创伤性股骨头坏死发病风险的关联，对非创伤性股骨头坏死分子预警及分子水平防治具有重大价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及检测与非创伤性股骨头坏死风险性有关基因的单核苷酸多态性的物质，进一步将其用于非创伤性股骨头坏死的分子预警、药物治疗靶标和临床分子诊断与分型。

背景技术

股骨头坏死(osteonecrosisofthefemoralhead，ONFH)是由遗传因素与环境因素共同作用引起的复杂性疾病。在近10多年来，ONFH的发病率呈现逐年增加的趋势。据估计在美国年均20000～30000位患者被新诊断为ONFH，在中国每年新增ONFH病例为150000～200000，而且目前中国成年人ONFH患者812万人，主要发病群体为40岁至50岁之间的青壮年，致残率高，导致严重社会与家庭经济负担，是目前人类健康面临主要挑战之一。及早发现ONFH遗传学分子诊断标志物进而实施早期分子预警，使其防治时段前移，是降低ONFH发病率的关键。

近年来ONFH分子发病机理研究进展的重要标志之一，是陆续提出了纤溶酶原激活/抑制系列、血管生成系列、脂代谢系列、Ⅱ型胶原系列、细胞因子系列、生长因子系列基因多态性与ONFH的发病风险相关，它们或者与另外一些基因形成连锁不平衡共同影响ONFH的发病，或者影响其它易感基因的表达功能，在ONFH的发生发展中起协同作用。这些遗传分子病因学研究结果清晰地提示，ONFH属于多个微效基因联合参与并由环境因素诱导的复杂病。

CEBPA基因染色体位置19q13.11，含有1个外显子。该基因编码一个转录因子，它包含一个碱性亮氨酸拉链(bZIP)结构域，并识别靶基因启动子中的CCAAT基序。编码的蛋白质在同型二聚体和含CCAAT/增强子结合蛋白β和γ的异二聚体中起作用。CEBPA基因编码蛋白可以调节参与细胞周期调节和体重动态平衡的基因表达。该基因参与多种不同转录因子的转录协同激活。

CREBBP基因染色体位置16p13.3，含有33个外显子。该基因最初作为一种结合cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的核蛋白被分离出来，其通过将染色质重构与转录因子识别偶联，在胚胎发育、生长控制和体内平衡中发挥关键作用。由该基因编码的蛋白质具有固有的组蛋白乙酰转移酶活性，并作为支架稳定其它蛋白质与转录复合物之间的相互作用。涉及该基因的染色体易位与急性髓系白血病有关。

PPARγ基因色体位置3p25.2，含有14个外显子。该基因编码核受体过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)亚家族成员。PPARs与维甲酸X受体(RXRs)形成异二聚体，这些异二聚体调节各种基因的转录。已知有三种PPAR亚型，PPARα、PPARδ和PPARγ。PPARγ是脂肪细胞分化的主控制器。此外，PPARγ与许多疾病的病理学有关，包括ONFH、肥胖、糖尿病、动脉粥样硬化和肿瘤。

ONFH病变骨髓腔往往充填了大量脂肪组织，因而脂代谢紊乱早已被公认为股骨头坏死核心发病环节之一。鉴于动物实验及临床研究已充分证实，高脂环境可以抑制成骨细胞的分化，高脂血症后骨髓内脂肪细胞增多增大压迫股骨头微血管引起骨细胞缺血性坏死，较早就推测成脂与成骨分化的调控异常可能在ONFH发生发展起关键作用，但一直不清楚其脂肪蓄积的分子机理。