[发明专利]一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法

权利要求书

1.一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：取BLAB/C裸鼠90只作为实验组，对照组30只，统一放入培养箱中进行正常培养；

步骤二：在BLAB/C裸鼠呼吸和心跳等正常的情况下，将小鼠麻醉并以仰卧位固定在动物手术台上进行实验；

步骤三：在小鼠的左侧肋骨5/6肋间隙与左侧胸壁腋前线的交点处，使用显微镊提拉该处的皮肤，随后使用22G无菌锐针头对该处皮肤进行破口，随后使用30G无菌钝针头沿上述破口对壁层胸膜进行破溃；

步骤四：沿提拉皮肤的反向方位对裸鼠胸腔进针，破溃肋间肌及壁层胸膜约0.5-0.6mm，旋转针头于左侧胸壁内侧平行进针，并使针头方向指向左侧胸锁关节，体表观察针头位置，并于距离左侧胸锁关节1mm处停止进针，注射肿瘤细胞悬液60-80μl；

步骤五：注射完成后，将针头退出，并观察小鼠的生命体征；

步骤六：每隔1个月对实验组和对照组的小鼠进行一次体重称量并记录数据，实验组的小鼠从诱发后的第三个月开始，每隔1-3个月对小鼠分批次进行胸部CT扫描，实时观察小鼠体内的肿瘤的变化情况。

2.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤一中，BLAB/C裸鼠选取的标准为体重16-18g，小鼠身体各项机能正常，且雌雄各半，且实验组的90只小鼠分为三组，分别命名为大剂量组、中剂量组和小剂量组。

3.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤三中，对小鼠的左侧肋骨5/6肋间隙与左侧胸壁腋前线的交点处破口时注意不损坏该处的壁层胸膜。

4.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤四中，小剂量组注射肿瘤细胞悬液60μl，中剂量组注射肿瘤细胞悬液70μl，大剂量组注射肿瘤细胞悬液80μl。

5.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤四中，进针的距离应＜6mm。

6.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤四中，实验组每月注射一次，每次60-80μl，连续注射两个月，对照组按照同样的方法和位置注射灭菌生理盐水，每月注射一次，每次注射60-80μl，并连续注射两个月。

7.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤五中，对实验组和对照组的小鼠进行观察时，每月称体重1次，并记录体重数据，整个实验历时两年。

8.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤六中，每次扫描实验组小鼠10-20只，扫描对照组小鼠3-5只，实验组小鼠每次扫描完成后，不立即处理掉小鼠，待其自然死亡。

9.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤六中，对于濒死或已经死亡的小鼠，先进行胸部CT扫描后，再进行尸解病理学的检查，观察小鼠胸膜内是否已经诱发肿瘤。

10.根据权利要求1所述的一种新型小鼠原位胸膜间皮瘤模型及其建立方法，其特征在于：所述步骤六中，对三组实验组和一组对照组的肿瘤诱发率、小鼠死亡率等数据进行实时记录并制定表格。