[发明专利]一种运输细胞的试剂及方法

权利要求书

1.一种运输细胞的试剂，其特征在于：所述试剂由50%-100%血清、0%-50%细胞培养基、青霉素和链霉素组成，青霉素在细胞培养基中的终浓度为100 U/mL，链霉素在细胞培养基中的终浓度为 100μg/mL；所述细胞为C3H10 小鼠骨髓间充质干细胞株、143B人骨肉瘤细胞株或LX-2人肝星状细胞株。

2.如权利要求1所述的运输细胞的试剂，其特征在于：所述血清为牛血清或马血清。

3.如权利要求2所述的运输细胞的试剂，其特征在于：所述牛血清为胎牛血清或小牛血清。

4.如权利要求1-3任一项所述的运输细胞的试剂，其特征在于：所述细胞培养基采用DMEM、MEM或DMEM/F12细胞培养基。

5.一种采用如权利要求1-3任一项所述试剂的运输细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，细胞培养于培养瓶或培养皿中，细胞融合度90%-100%，细胞密度为2~10×10⁶/25cm²，每25cm²培养面积加入1mL胰酶消化细胞，37℃，消化时间1-3分钟，待细胞变圆分散，按2-5:1比例加入完全培养基，吹打细胞；

步骤2，将细胞悬液转入离心管，800-1200rpm离心3分钟，吸弃培养基；

步骤3，在离心管中加入PBS，吹打洗涤次，800-1200rpm离心3分钟，吸弃培养基；

步骤4，按每25 cm²培养面积的细胞沉淀加入1mL所述试剂，吹打均匀，转移至细胞冻存管中，每只冻存管加入1mL细胞悬液；

步骤5，封口胶封口细胞冻存管，运输细胞，运输中的细胞保存温度为2℃-16℃，保存时间为10天以内；

步骤6，往培养瓶或培养皿中加入含100 U/mL青霉素和 100 μg/mL链霉素的细胞培养基，打开细胞冻存管，直接将细胞悬液加入细胞培养基中，细胞培养基中血清终浓度为10%。

6.如权利要求5所述运输细胞的方法，其特征在于：所述步骤3重复操作2-3次。