[发明专利]一种分析膜蛋白和膜相互作用的分子测力计及其制备方法

权利要求书

1.一种分析膜蛋白和膜相互作用力的分子测力计，其特征在于，所述的分子测力计以空心二氧化硅微球为载体，在其表面先组装一层磷脂分子层，再利用疏水相互作用使两端分别修饰特定长度烷烃链与叠氮基团的DNA1吸附到磷脂单分子层上，最后疏水自组装上第二层磷脂分子层制得。

2.根据权利要求1所述的分子测力计，其特征在于所述的磷脂双分子层制备是先将空心二氧化硅微球表面环氧基硅烷化，共价修饰一层1，2-二硬酯酰-sn-甘油-3-磷酰乙醇胺，通过疏水相互作用再组装一层1，2-二硬酯酰-sn-甘油-3-磷酰乙醇胺形成。

3.根据权利要求1所述的分子测力计，其特征在于所述的DNA1嵌入是利用DNA1末端的烷烃链与磷脂双分子层间的疏水相互作用实现的。通过改变烷烃链长度，可获得一系列具有不同疏水相互作用力的分子测力计。

4.根据权利要求1所述的分子测力计，其特征在于所述的检测过程首先用二苯并环辛炔、二嗪基团和染料FAM标记的DNA2中的核酸适配体识别细胞表面待检测的膜蛋白，再在紫外光下将核酸适配体末端修饰的二嗪基团与相应膜蛋白共价连接，进一步利用叠氮和二苯并环辛炔间的点击化学反应将分子测力计共价连接到与膜蛋白的DNA2上，再利用分子测力计的浮力激发烷烃链-磷脂双分子层相互作用与膜蛋白-细胞膜相互作用间的竞争，导致膜蛋白从细胞膜中拔出。

5.根据权利要求1所述的分子测力计，其特征在于所述的检测方法是在待测膜蛋白从细胞膜中拔出后，对不同分子测力计处理过的细胞进行荧光成像，确定细胞表面荧光强度下降前后所使用的分子测力计上的烷烃链长度，与光镊获得的相互作用力标尺对比，实现膜蛋白与细胞膜相互作用力的定量。