[发明专利]大鼠线粒体基因G14098A的突变方法及其应用

权利要求书

1.一种大鼠线粒体基因G14098A的突变方法，包括：

在目标突变碱基G位置上下游分别选定一个TALE识别靶序列，两个TALE识别靶序列中间的间隔序列为7-18bp且不含除目标突变碱基G之外的碱基G，其中两个TALE识别靶序列与间隔序列一起限定目标突变序列；

根据选定的TALE识别靶序列筛选一对DdCBE组合；以及

共注射所筛选的DdCBE组合以将其定位于目标突变序列，从而将目标突变碱基G编辑为A而引入突变，

其中所选定的两个TALE识别靶序列分别为：

左侧识别靶序列：ttaactgtgactaat；以及

右侧识别靶序列：agttgaattacggcgat，

其中所筛选的DdCBE组合为：

如序列3所示的Rat G14098A Left TALE-G1333C和如序列4所示的Rat G14098A RightTALE-G1333N；

如序列5所示的Rat G14098A Left TALE-G1397C和如序列6所示的Rat G14098A RightTALE-G1397N；

如序列7所示的Rat G14098A Left TALE-G1333N和如序列8所示的Rat G14098A RightTALE-G1397C；或

如序列9所示的Rat G14098A Left TALE-G1397N和如序列10所示的Rat G14098ARight TALE-G1333C。

2.根据权利要求1的突变方法，其中所筛选的DdCBE组合为：

Rat G14098A Left TALE-G1397C和Rat G14098A Right TALE-G1397N。

3.根据权利要求1或2所述的方法在构建线粒体基因靶位点G14098A突变大鼠模型中的应用。

4.根据权利要求3的应用，其中突变在大鼠细胞系C6中进行。

5.根据权利要求3的应用，其中突变在大鼠受精卵中进行。