[发明专利]食品中黄曲霉毒素B1的电化学传感检测方法及修饰电极

权利要求书

1.一种用于检测黄曲霉毒素B1的修饰电极的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）基底工作电极抛光处理

1.1）打磨工作电极：首先采用氧化铝抛光粉将工作电极打磨成镜面，再将打磨成镜面的工作电极分别在蒸馏水中、无水乙醇中、蒸馏水中依次超声清洗5 min，随后在冷空气中吹干；

1.2）判断电极打磨合格：将步骤1.1）中吹干的工作电极、参比电极、对电极三电极体系置于电化学探针溶液中，利用循环伏安法扫描，并与理论标准谱对照两峰之间的电位差，在规定范围内即电极打磨合格；所述工作电极为玻碳电极，所述参比电极为饱和甘汞电极或银/氯化银电极，所述对电极为铂、金或钨；

（2）基于BP -MWCNTs- Nafion修饰电极的制备

将块状黑磷与含有饱和 NaOH 和 5 μM AgNO₃ 的N-甲基吡咯烷酮溶液一起分散到三颈瓶中，将分散液在冰浴条件下连续超声 6 h，超声过程中持续通入氮气；超声得到的棕色悬浮液1500 rpm离心10 分钟，将未剥离完全的块状黑磷再次转移到三颈瓶中进行超声处理，重复上述步骤；

随后，两次产生的悬浮液混合均匀后，12,000 rpm离心30 min，收集沉淀即为制得的黑磷纳米片；用30 mL的N-甲基吡咯烷酮重悬后再次离心；最后将所得到的黑磷纳米片等分为两份，一份真空干燥并称重定量，另一份用于制备MWCNTs/BP纳米复合材料；所述纳米复合材料的制备是将 45 mg MWCNTs 添加到 15 mL的BP溶液中，并将混合物超声处理1小时以获得均匀的MWCNTs / BP分散液；BP为7层的黑磷纳米片，MWCNTs为多层的羧基化碳纳米管；

将Nafion作为电极粘合剂添加到MWCNTs-BP分散液中混合均匀以制备Nafion /MWCNTs / BP；然后，将5 μL制备的BP -MWCNTs- Nafion纳米复合材料滴涂在抛光后的GCE表面并在红外灯下干燥；

（3）修饰电极的自组装过程

3.1）将修饰电极BP -MWCNTs- Nafion/GCE浸入300μL含有20 mM EDC 和5 mM NHS的混合溶液中30分钟以活化MWCNTs的羧基；

3.2）将5 μL纳米抗体滴在经过步骤3.1）处理后的电极表面上，并在室温下孵育90分钟；

3.3）取5 μL的0.5%牛血清蛋白溶液覆盖步骤3.2）处理后的电极上，室温下反应1小时以封闭可能剩余的空白位点，然后用0.1 M磷酸盐缓冲溶液冲洗；获得BSA / Nb / BP -MWCNTs- Nafion修饰电极。

2.根据权利要求1所述的修饰电极的制备方法，其特征在于：所述氧化铝抛光粉的粒径为0.05 µm。

3.根据权利要求1所述的修饰电极的制备方法，其特征在于：所述电化学探针溶液为5mL含有 5 mmol/L [Fe(CN)₆]^3-/4-或5mmol/L [Ru(NH₃)₆]^2+/3+的0.1 M磷酸盐缓冲液。

4.采用权利要求1-3任一所述的制备方法制得的修饰电极。