[发明专利]食品中黄曲霉毒素B1的电化学传感检测方法及修饰电极

说明书

本发明涉及一种食品中黄曲霉毒素B1的电化学传感检测方法及修饰电极，属于食品安全检测技术领域。该修饰电极的制备方法包括以下步骤：1)基底工作电极的抛光处理；(2)基于BP‑MWCNTs‑Nafion修饰电极的制备；3)修饰电极的自组装过程。采用该修饰电极对食品中黄曲霉毒素B1进行电化学传感检测的方法，包括以下步骤：1)建立黄曲霉毒素B1检测标准工作曲线；2)实际样品中黄曲霉毒素B1定量快速分析。本发明提供的快速高灵敏检测食品中黄曲霉毒素B1的电化学传感检测方法，电极易于制备且成本低廉，操作便捷，检测快速，重复性和重现性好，抗干扰能力强，可用于茶叶、谷物等实际样品中黄曲霉毒素B1的定量快速检测。

技术领域

本发明涉及食品安全检测技术领域，特别是涉及一种食品中真菌毒素黄曲霉毒素B1的电化学传感检测方法。

背景技术

黄曲霉毒素是真菌产生的毒性最强的真菌毒素之一，长期摄入后会危害人类和动物的健康。在已发现的黄曲霉毒素中，黄曲霉毒素B1(AFB1)是毒性最强的一种，分子量为312.27Da，被国际癌症研究机构(IARC)列为I类致癌物。

常规的真菌毒素检测方法有酶联免疫吸附法(ELISA)、侧向流动免疫层析法(LFI)和色谱分析法等，上述分析法难以实现真菌毒素的快速和实时在线检测。电化学免疫传感器是实现真菌毒素早期预警的有效手段，

因此，寻找一种操作便捷、检测快速、重现性及稳定性好、成本低的检测方法是本领域亟需解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种食品中黄曲霉毒素B1的电化学传感检测方法及修饰电极。

一种用于检测黄曲霉毒素B1的修饰电极的制备方法，包括以下步骤：

(1)基底工作电极抛光处理

1.1)打磨工作电极：首先采用氧化铝抛光粉将工作电极打磨成镜面，再将打磨成镜面的工作电极分别在蒸馏水中、无水乙醇中、蒸馏水中依次超声清洗5min，以彻底去除吸附在玻碳电极表面上的氧化铝粉末和其它污染物，随后在冷空气中吹干；

1.2)判断电极打磨合格：将步骤1.1)中吹干的工作电极、参比电极、对电极三电极体系置于电化学探针溶液中，利用循环伏安法扫描，并与理论标准谱对照两峰之间的电位差，在规定范围内即电极打磨合格；

(2)基于BP-MWCNTs-Nafion修饰电极的制备

少层BP纳米片是使用大量黑磷块通过液体超声剥离法而制备的，大约在7层左右。具体来说，是将块状黑磷(50.0mg)与100mL含有饱和NaOH和5μM AgNO₃的N-甲基吡咯烷酮(NMP)溶液一起分散到三颈瓶中，将分散液在冰浴条件下连续超声6h，在这个过程中持续通入氮气以消除溶解的氧分子从而避免黑磷发生氧化。超声得到的棕色悬浮液1500rpm离心10分钟，将未剥离完全的块状黑磷再次转移到三颈瓶中进行超声处理，重复上述步骤。随后，两次产生的悬浮液混合均匀后，12,000rpm离心30min，收集沉淀即为制得的少层黑磷纳米片，即黑磷烯(BP)。将获得的黑磷烯通过离心洗涤的方法去除多余的NaOH和AgNO₃。最后将所得到的黑磷烯等分为两份，一份真空干燥并称重定量，另一份用于制备MWCNTs/BP纳米复合材料。纳米复合材料的制备是将45mg MWCNTs添加到15mL的BP溶液中，并将混合物超声处理1小时以获得均匀的MWCNTs/BP分散液。

将Nafion(0.05％)作为电极粘合剂添加到MWCNTs-BP分散液中混合均匀以制备Nafion/MWCNTs/BP。然后，将5μL制备的BP-MWCNTs-Nafion纳米复合材料滴涂在抛光后的GCE表面并在红外灯下干燥。

(3)修饰电极的自组装过程