[发明专利]一种通用型快速提取生物样本总核酸的试剂盒及方法在审

专利信息
申请号: 202110951242.9 申请日: 2021-08-18
公开(公告)号: CN113652420A 公开(公告)日: 2021-11-16
发明(设计)人: 唐勇军;刘小龙;黄婷;罗俭康 申请(专利权)人: 深圳职业技术学院
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/6806
代理公司: 深圳市中科创为专利代理有限公司 44384 代理人: 徐方星;王建成
地址: 518000 广东省深*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 通用型 快速 提取 生物 样本 核酸 试剂盒 方法
【权利要求书】:

1.一种通用型快速提取生物样本总核酸的试剂盒,其特征在于,包括:Buffer ATL、Proteinase K、MBs磁珠、Buffer WSI、Buffer WSII、Buffer WSIII、Buffer ES;

所述Buffer ATL为包含有:盐酸胍、月桂酰肌氨酸钠、异丙醇的Tris-HCl缓冲液,Buffer ATL的pH为5.0-8.0;其中,盐酸胍的浓度为1-6mol/L,月桂酰肌氨酸钠的浓度为1-15wt%,异丙醇的浓度为40-60%v/v,所述Tris-HCl缓冲液浓度为10-50mmol/L;

所述Proteinase K为包含有:蛋白酶k、KCl、甘油的Tris-HCl缓冲液,Proteinase K的pH为5.0-8.0;其中,蛋白酶k的浓度为20-50mg/mL,KCl的浓度为50-150mmol/L,甘油的浓度为30-50%v/v,Tris-HCl缓冲液的浓度为10-50mmol/L;

所述MBs磁珠为包含有:羟基磁珠或羧基磁珠、NaCl、无水乙醇的Tris-HCl缓冲液,MBs磁珠的pH为5.0-8.0;其中,所述羟基磁珠或羧基磁珠的浓度为1-5mg/mL,粒径为200-1500nm;NaCl的浓度为100-500mmol/L,无水乙醇的浓度为15-25%v/v,Tris-HCl缓冲液的浓度为10-50mmol/L;

Buffer WSI为包含有:NaCl、异丙醇、PEG的Tris-HCl缓冲液;Buffer WSI的pH5.0-8.0;其中,NaCl的浓度为500-1000mmol/L,异丙醇的浓度为75-85%v/v,PEG的浓度为35-45wt%,其中PEG分子量范围在4000-10000,Tris-HCl缓冲液的浓度为10-50mmol/L;

Buffer WSII为包含有异丙醇的Tris-HCl缓冲液,Buffer WSII的pH为5.0-8.0;其中,异丙醇的浓度为75-85%v/v,Tris-HCl缓冲液的浓度为50-100mmol/L;

Buffer WSIII为包含有KCl的Tris-HCl缓冲液,Buffer WSIII的pH为6.8-9.0;其中,KCl的浓度为0.85-2wt%,Tris-HCl缓冲液的浓度为40-120mmol/L;

所述Buffer ES为含有乙二胺四乙酸二钠的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐,其中,乙二胺四乙酸二钠的浓度为1.0±0.2mmol/L,三羟甲基氨基甲烷盐酸盐的浓度为10±1mmol/L,Buffer ES的pH为6.0-8.0。

2.根据权利要求1所述的一种通用型快速提取生物样本总核酸的试剂盒,其特征在于,还包括:Buffer MDS,所述Buffer MDS为包含有NaCl、无水乙醇的Tris-HCl缓冲液,BufferMDS的pH为5.0-8.0;其中,NaCl的浓度为100-500mmol/L,无水乙醇的浓度为15-25%v/v,Tris-HCl缓冲液的浓度为6-16mmol/L;所述Buffer MDS为MBs磁珠的稀释剂;所述BufferMDS应用于自动化操作。

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