[发明专利]一种用于检测Avapritinib中间体中对映异构体的方法

说明书

本发明提供一种用于检测Avapritinib关键中间体对映异构体的方法，采用的色谱条件为：色谱柱为CHIRALCEL*OD‑H 4.6*250mm，5um色谱柱，柱温为30℃，检测波长220nm，流动相为正己烷:乙醇:异丙醇＝99～102:0.1～1:0.5，流速为0.8～1.0mL/min；利用本发明的方法可以准确地进行(S)‑1‑(4‑氟苯基)‑1‑[2‑(哌嗪‑1‑基)嘧啶‑5‑基]乙胺中对映异构体(R)‑1‑(4‑氟苯基)‑1‑[2‑(哌嗪‑1‑基)嘧啶‑5‑基]乙胺的定量分析，本发明能有效地对对映异构体进行分离检测，峰型对称，无拖尾现象，分离度、专属性、定量限与检测限、线性、重复性、准确度、精密度、溶液稳定性、耐用性均符合要求，检测效果良好。

技术领域

本发明涉及Avapritinib技术领域，特别涉及一种用于检测Avapritinib中间体中对映异构体的方法。

背景技术

avapritinib(Ava)是一种口服、强效、高选择性酪氨酸激酶抑制剂(tyrosinekinase inhibitors，TKI)，由Blueprint Medicines公司研发，于2020年1月9日获美国食品和药物管理局(FDA)批准上市。

在对KIT/PDGFRα突变GIST患者的最新研究中，Ava已经显示出包括PDGFRαD842V突变患者在内的初步疗效，并有可能成为该突变亚群一线治疗药物。Ava常规给药方案为每日空腹口服1次，每次300mg，直至患者疾病进展或出现不能耐受的不良反应，其结构式见图1。

其结构式见图1。

Ava为一种TypeⅠ型TKI，主要通过识别激酶的活性构象，竞争性地结合在ATP结合位点上，抑制激酶的自身磷酸化从而阻断细胞增殖信号，最后阻止肿瘤细胞生长。

Ava作为一种TKI，已被证实对KIT和PDGFRα突变具有广泛抑制作用，临床前研究显示，Ava可强效、精准地抑制PDGFRαD842V(IC50：0.24nmol·L-1)和KIT D816V(IC50：0.27nmol·L-1)突变。有研究表明Ava在GIST人源肿瘤异种移植模型中具有显著抗肿瘤活性，在KIT外显子11/17双突变GIST中，Ava比现有标准治疗方法更具活性。Ava除具有直接的抗肿瘤活性，还可以逆转ABCB1和ABCG2介导肿瘤细胞的耐药性。研究发现Ava在安全剂量范围(0.1～1.0μmol·L-1)内可促使过度表达ABCB1的NCI-ADR-RES卵巢癌细胞、KB-V1表皮癌细胞和MDR19-HEK293细胞对紫杉醇恢复敏感性，并且该效应与Ava药物浓度成正比，还可促使过度表ABCG2的S1-M1-80直肠癌细胞、人H460-MX20肺癌细胞和R482-HEK293细胞对米托蒽醌恢复敏感性，此外还发现Ava除了促使过度表达ABCB1的多重耐药肿瘤细胞对秋水仙碱和多柔比星恢复敏感性，还可以促使过度表达ABCG2的多重耐药肿瘤细胞对拓扑替康和SN-38恢复敏感性。

经文献检索，所报道的Avapritinib合成主要路线之一是以(S)-1-(4-氟苯基)-1-[2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基]乙胺作为关键中间体，和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪反应制备得到。

Avapritinib对映异构体来源于关键中间体(S)-1-(4-氟苯基)-1-[2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基]乙胺中的对映异构体，其对映异构体的大小可决定Avapritinib对映异构体的大小。为确保临床用药的安全有效，根据手性药物指导原则，有必要对Avapritinib关键中间体(S)-1-(4-氟苯基)-1-[2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基]乙胺中的((R)-1-(4-氟苯基)-1-[2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基]乙胺进行有效的质量控制。