[发明专利]脂肪酶3的特征性肽段及在鉴别无刺蜂蜂蜜中的应用

说明书

本发明公开了脂肪酶3的特征性肽段及在鉴别无刺蜂蜂蜜中的应用，属于生物技术领域，解决了现有技术中尚未有一种方法能将无刺蜂蜂蜜与其它种类的蜂蜜区分开来。本发明提供的脂肪酶3的特征性肽段的氨基酸序列为QFAHYGQSILSGK，可用于鉴别无刺蜂蜂蜜。本发明利用脂肪酶3的特征性肽段鉴别无刺蜂蜂蜜的方法包括：采用HPLC‑MS/MS检测蜂蜜样品，如检测出如SEQ.ID：1所示特征性肽段，则判定该蜂蜜样品为无刺蜂蜂蜜；如未检测，则判定该蜂蜜样品非无刺蜂蜂蜜。本发明首次提供了用于鉴别无刺蜂蜂蜜的特征性肽段，采用该特征性肽段鉴别无刺蜂蜂蜜结果准确，操作方便。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及脂肪酶3(Lipase 3)的特征性肽段及在鉴别无刺蜂蜂蜜中的应用。

背景技术

无刺蜂(Stingless bee)别名蚁蜂、小酸蜂、无螫蜂，属于蜜蜂总科(Apoidea)，蜜蜂科(Apidae)，麦蜂族(Meliponini)，主要分布于热带地区，是热带地区主要传粉昆虫之一。无刺蜂蜂蜜是无刺蜂从植物蜜腺或其他部位采来的花蜜，经充分酿造后存储于巢内，与其他蜜蜂蜂蜜相比，具有水分含量高、酸度高、黏度低等特点。

目前国内普遍饲养的蜜蜂为中华蜜蜂和意大利蜜蜂，市面上常见的流通蜂蜜亦为中华蜜蜂蜂蜜(以下简称为中蜂蜜)和意大利蜜蜂蜂蜜(以下简称为意蜂蜜)。由于无刺蜂生存环境的限制，目前无刺蜂饲养的普及程度并不高，市场对无刺蜂蜂蜜的认识程度也不高，但是随着研究的深入，人们逐渐意识到无刺蜂具有一些优越于其他品种蜜蜂的特点，如对人类无害而且易驯养，对蜜蜂的常见病虫害有抵抗力。因此无刺蜂必将越来越受到重视，另一方面，研究发现无刺蜂蜂蜜中的还原糖含量和淀粉酶值较其他蜂蜜低，酸度较高，具有广泛的药效作用且涉及人体多个系统，如：消化系统、呼吸系统、女性生殖系统、皮肤及外表病变。在危地马拉、墨西哥和委内瑞拉，无刺蜂蜂蜜常被用作治疗白内障，并取得了不错的疗效。随着研究的深入，无刺蜂蜂蜜会越来越受到市场的重视，研究一种能够稳定、有效地鉴别无刺蜂蜂蜜真伪的方法就显得尤为重要。

目前现有技术鉴定蜂蜜的方法均围绕中蜂蜜和意蜂蜜，如申请号为CN202011120746.8公开了一种区分中蜂蜜与意蜂蜜的方法，通过对蜂蜜中C9T、C9P的含量和C9T、C9P与各自异构体的比例，鉴别中蜂蜜和意蜂蜜；申请号为CN201910791066.X公开了一种根据蜂蜜成分鉴别蜂蜜真假的方法，其主要是通过看气泡、看颜色、看粘度等多种物理方法鉴别蜂蜜的真伪；申请号为201910550683.0公开了检测中蜂蜜与意蜂蜜的ELISA检测试剂盒，所述技术依赖于蛋白质作为特征生物标志物进行鉴别，其需要复杂的样品前处理过程。

而目前现有技术中对于无刺蜂的研究主要还集中在其生物学特征上，对无刺蜂蜂产品的研究主要还集中在其蜂胶活性物质提取和鉴定上。国内对无刺蜂研究较为深入的研究团队即为发明人团队，诸如文献《Quality comparison of multifloral honeysproduced by Apis cerana cerana,Apis dorsata and Lepidotrigona flavibasis》《无刺蜂的研究概况与展望》《海南无刺蜂蜂蜜中多酚类物质成分分析及其抗氧化、抗炎活性评价》《两种无刺蜂蜂胶乙酸乙酯提取物中总酚含量及其抗氧化性比较》等，总体而言，不论是我国还是世界范围内对无刺蜂及无刺蜂蜂蜜的研究还处于起步阶段。

因此，目前尚未有一种有效、可靠的方法能将无刺蜂蜂蜜与其他种类的蜂蜜区分开来。因此，提供一种结果准确、操作简便的无刺蜂蜂蜜鉴别方法，成为了本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于，提供脂肪酶3的特征性肽段及应用；通过检测蜂蜜是否含有脂肪酶3的特征性肽段，以确定其是否为无刺蜂蜂蜜。

本发明采用的技术方案如下：

本发明提供的一种脂肪酶3(Lipase 3)的特征性肽段，该特征性肽段的氨基酸序列如SEQ.ID：1所示：QFAHYGQSILSGK。