[发明专利]一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法

权利要求书

1.一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法，特征是包括如下步骤：

(1)发光细菌复苏：在超净工作台取复苏液加入发光细菌冻干粉中，轻轻震荡摇匀，复苏等待10min。

(2)毒性实验

①取复苏后发光菌液，用2％NACl溶液按照1∶40的体积比稀释。

②根据实验所需，配置阻垢剂类物质溶液和阳性质控溶液。大多数阻垢剂可以直接溶于水中，用2％NACl溶液作为溶剂，根据需要配置所需浓度的阻垢剂溶液，用于后续实验。

③浓度组的设定，根据实验需要设置5个浓度梯度和1个空白对照组，每个实验组设置3个平行。

④上机测定：以96孔板第一行为阴性指控，记录发光强度为C₀；第二行为阳性质控，其余行用于其他五个实验组，测定发光强度并记为C_i。

⑤15min后，再次测试各孔发光强度。

(3)数据处理分析：依次计算各浓度阻垢剂类物质对发光细菌的发光抑制率IR并进行分析。

2.据权利要求1所述的一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，步骤(1)中的发光细菌冻干粉的取用量具体用量根据发光量和仪器要求确定，复苏液取用量根据发光细菌冻干粉用量决定。

3.据权利要求1所述的一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，步骤(2)中的阳性质控液一般可选用10mg/L的ZnSO₄·7H₂O溶液。

4.据权利要求1所述的一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，步骤(2)中配置的阳性质控液和各浓度组溶液，溶剂均为2％NACl溶液。

5.据权利要求1所述的一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，步骤(2)中进行上机测试时，可使用多功能酶标仪、化学发光仪等多种仪器。

6.据权利要求1所述的一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，步骤(2)中进行上机测试加样时，各组分别向96孔板对应各孔中加入样品180μL和菌液20μL。

7.据权利要求1所述的一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，步骤(3)中计算公式为IR＝(1-C_i/C₀)×100％。

8.据权利要求1所述的一种用发光细菌对阻垢剂类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，整个实验尽量在16-25℃的条件下进行。