[发明专利]负载基因诊断探针和/或抗肺纤维化药物的纳米制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种负载基因诊断探针和/或抗肺纤维化药物的纳米制剂及其制备方法，同时负载有基因诊断探针和抗肺纤维化药物，基因诊断探针依赖于荧光能量共振转移原理实现对早期肺纤维化的诊断，并与抗肺纤维化协同调节II型肺泡上皮细胞的稳态平衡，达到诊疗协同治疗早期肺纤维化的目的。另一方面，利用一种含有活性氧（ROS）特异性敏感脂质片段的纳米制剂及其载体，借助ROS特异性敏感脂质片段促进抗肺纤维化药物的瞬时释放，实现诊疗协同调节早期肺纤维化的目的，进而为逆转早期肺纤维化的治疗提供了一种新的途径和策略。

技术领域

本发明公开了一种负载基因诊断探针和/或抗肺纤维化药物的纳米制剂及其制备方法。

背景技术

肺纤维化是一种肺功能进行性下降的慢性肺间质疾病，临床呈现高发病率和死亡率等特点。研究证实，II型肺泡上皮细胞(Alveolar epithelial cells，AEC II)异常损伤是造成肺纤维化发生与进展的关键病因。损伤AEC II胞内线粒体由于氧化应激失衡而分泌大量活性氧自由基(Reactive oxygen species，ROS)到胞质中，通过激活AECs II胞内多种半胱氨酸蛋白酶而刺激促炎因子白介素1β(Interleukin 1β，IL 1β)和白介素13(Interleukin 13，IL 13)在胞质过表达，造成损伤AECs II胞内炎症反应过度激活，其分泌到胞外后刺激肺泡巨噬细胞过度增殖、促进免疫反应异常激活，加速早期肺纤维化进程。目前，针对肺纤维化治疗出现了多种治疗剂，一方面是化学药物的开发，包括质固醇类药物、免疫抑制剂类、吡非尼酮和尼达尼布等；另一方面，通过开发纳米制剂提高药物在病灶部位蓄积量而提高疾病治效果。然而，两者均无法达到理想的治疗效果。

肺纤维化的病程复杂(分为早、中、晚期)、不同病程的病理机制有明显差异，早期以损伤AECs II稳态失衡及免疫反应过度激活为主；中晚期肺纤维化以MFs异常活化及ECM过度蓄积为主。所以，在无法诊断肺纤维化病程阶段的情况下，单纯抑制一条或几条病理通路的治疗策略会造成盲目性增加，治疗针对性降低，使处于不同病理阶段的肺纤维化病人无法得到对症治疗，易造成病情延误影响疾病治疗效果。因此，开发出能够精准识别肺纤维化不同阶段并进行针对性治疗的纳米制剂对于肺纤维化的逆转治疗具有重要作用。

发明内容

目的：为了克服肺纤维化治疗中病程难以诊断的临床问题，本发明公开了一种负载基因诊断探针和/或抗肺纤维化药物的纳米制剂及其制备方法。

技术方案：为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

根据本发明的第一方面，提供一种用于负载基因诊断探针和抗肺纤维化药物的纳米制剂载体，所述纳米制剂载体包括X-mPEG、磷脂P、胆固醇C及修饰有ROS响应的敏感脂质片段L；

其中X为疏水段，X选自DSPE，DOPE，DPPE，DMPE；

P为阳离子脂质，选自DMG-PEG2000、Dlin-MC3-DMA、DOTMA、DOP-DEDA、 DC-Cholesterol、DOTAP、PEI及其衍生物、lipofectamine 2000；

修饰有ROS响应的敏感脂质片段L由疏水段L1、ROS敏感性基团L2和亲水段L3组成，疏水段L1选自DSPE、DOPE、DPPE，DMPE、PLGA、PLA、PCL、PAA、PLL、cholesterol； ROS敏感性基团L2选自硫醚键、聚丙烯硫醚、酮缩硫醇、含硒基团、草酸酯、苯硼酸及苯硼酸酯衍生物；亲水段L3选自聚乙二醇、环氧乙烯、环氧乙烷、泊洛沙姆、聚山梨酯80、乙二胺衍生物908、环糊精、聚山梨醇酯、聚乙烯醇。

在一些实施例中，所述抗肺纤维化药物包括疏水性抗肺纤维化药物和/或亲水性抗肺纤维化药物、具有抗肺纤维化功能的细胞因子、抗体、蛋白、生物活性分子；