[发明专利]一种创伤弧菌灭活疫苗及其制备方法和用途有效

专利信息
申请号: 202110961269.6 申请日: 2021-08-20
公开(公告)号: CN113694192B 公开(公告)日: 2023-10-17
发明(设计)人: 张敏;顾勤勤;王光花;郝东方;刘红梅 申请(专利权)人: 青岛农业大学
主分类号: A61K39/106 分类号: A61K39/106;A61P31/04;C12N1/20;C12N1/36;C12R1/63
代理公司: 北京云嘉湃富知识产权代理有限公司 11678 代理人: 阮文
地址: 266109 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 创伤 弧菌 疫苗 及其 制备 方法 用途
【权利要求书】:

1.一种创伤弧菌灭活疫苗的制备方法,其特征在于,包括:

1)将TC38抗菌肽加入到创伤弧菌菌液中,进行灭活处理,得到灭活的创伤弧菌孵育液;

2)将所述灭活的创伤弧菌孵育液离心,收集菌体沉淀,得灭活菌体;

3)将所述灭活菌体以无菌PBS清洗数次后,分散于无菌PBS中,即得灭活疫苗。

2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,还包括:

4)对灭活菌体进行无菌检验;

优选地,所述无菌检验是通过包括下述步骤的方法实现的:将所述灭活菌体以无菌PBS稀释后,取适量涂布于固体培养基,28℃培养24~48h,以确认创伤弧菌是否灭活完全。

3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述创伤弧菌菌液是通过包括下述步骤的方法制备得到的:

将于-80℃保存的创伤弧菌以液体LB培养基复苏至对数生长中期,然后经离心、清洗后重悬于无菌PBS中,即得;优选地,重悬后得到的创伤弧菌菌液浓度为2×108CFU/mL。

4.如权利要求1-3中任一项所述的制备方法,其特征在于,所述TC38抗菌肽为氨基酸序列与SEQ ID NO:1的同源性不低于85%的多肽。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法制备得到的创伤弧菌灭活疫苗。

6.一种用于预防或治疗海洋养殖动物创伤弧菌感染的药物,其特征在于,包含如权利要求5所述的创伤弧菌灭活疫苗;优选地,有效量为0.182mg/条。

7.如权利要求5所述的创伤弧菌灭活疫苗在制备用于预防或治疗海洋养殖动物创伤弧菌感染的药物中的应用。

8.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述海洋养殖动物选自鳗鲡、石斑鱼、鲟鱼、罗非鱼、金鲳鱼或大菱鲆中的一种或多种。

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