[发明专利]猪易感相关致病菌检测的LAMP引物组及基于此的试剂盒和LAMP芯片和应用

权利要求书

1.猪易感相关致病菌检测的LAMP引物组，所述猪易感相关致病菌包括：猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪霍乱沙门氏菌、猪支气管败血波氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪链球菌和猪丹毒；所述LAMP引物组包括猪胸膜肺炎放线杆菌引物组、副猪嗜血杆菌引物组、猪霍乱沙门氏菌引物组、猪支气管败血波氏杆菌引物组、多杀性巴氏杆菌引物组、猪链球菌引物组和猪丹毒引物组；

所述猪胸膜肺炎放线杆菌引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向外引物F3，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的反向外引物B3，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的正向内引物FIP和核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的反向内引物BIP；

所述副猪嗜血杆菌引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的正向外引物F3，核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的反向外引物B3，核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示的正向内引物FIP和核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示的反向内引物BIP；

所述猪霍乱沙门氏菌引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的正向外引物F3，核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示的反向外引物B3，核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示的正向内引物FIP和核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示的反向内引物BIP；

所述猪支气管败血波氏杆菌引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示的正向外引物F3，核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示的反向外引物B3，核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示的正向内引物FIP和核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示的反向内引物BIP；

所述多杀性巴氏杆菌引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示的正向外引物F3，核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示的反向外引物B3，核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示的正向内引物FIP和核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示的反向内引物BIP；

所述猪链球菌引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示的正向外引物F3，核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示的反向外引物B3，核苷酸序列如SEQ ID NO.23所示的正向内引物FIP和核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示的反向内引物BIP；

所述猪丹毒杆菌引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示的正向外引物F3，核苷酸序列如SEQ ID NO.26所示的反向外引物B3，核苷酸序列如SEQ ID NO.27所示的正向内引物FIP和核苷酸序列如SEQ ID NO.28所示的反向内引物BIP。

2.一种猪易感相关致病菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的LAMP引物组和反应液。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述反应液包括Bst DNA聚合酶、10×Isothermal Amplification反应缓冲液、BSA-A、dNTP、MgSO₄水溶液和荧光染料。

4.一种检测猪易感相关致病菌的LAMP芯片，其特征在于，所述芯片包括权利要求1所述的LAMP引物组、反应液和芯片。

5.根据权利要求4所述的LAMP芯片，其特征在于，所述LAMP引物组中任一病菌对应的外引物对和内引物对的摩尔比均为1:8。

6.根据权利要求4所述的LAMP芯片，其特征在于，所述反应液包括Bst DNA聚合酶、10×Isothermal Amplification反应缓冲液、BSA-A、dNTP、MgSO₄水溶液和荧光染料。

7.根据权利要求4所述的LAMP芯片，其特征在于，所述芯片包括恒温扩增微流控芯片。

8.根据权利要求4所述的LAMP芯片，其特征在于，所述LAMP芯片的扩增反应池中包括：副猪嗜血杆菌反应池、猪霍乱沙门氏菌反应池、猪支气管败血波氏杆菌反应池、多杀性巴氏杆菌反应池、猪链球菌反应池、猪丹毒反应池、猪胸膜肺炎放线杆菌反应池和阴性对照组反应池。