[发明专利]一种仙茅糖基转移酶Co84A-471基因及在制备苔黑酚葡萄糖苷中的应用

说明书

本发明公开一种仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因及在制备苔黑酚葡萄糖苷中的应用。仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。以苔黑酚和糖基供体UDP‑葡萄糖为原料，在由仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因编码得到的仙茅糖基转移酶的催化下，在苔黑酚的C3或C5位上的羟基上进行一次糖基化，生成苔黑酚葡萄糖苷。本发明通过体外合成苔黑酚葡萄糖苷，可控性强，可以减少对原料种植的需求，节约农业用地，生产产物单一，便于后期苔黑酚葡萄糖苷的分离和纯化。所述仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因作为苔黑酚葡萄糖苷生物合成的关键基因，还可用于仙茅等植物育种研究。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种仙茅糖基转移酶Co84A-471基因及在制备苔黑酚葡萄糖苷上的应用。

背景技术

仙茅（Curculigo orchioides Gaertn）为石蒜科（Amaryllidaceae)仙茅属（Curculigo）药用植物，以根状茎入药。酚类成分在仙茅属中分布广泛，为主要成分，目前已从仙茅的根状茎中分离鉴定出多种酚苷类，其成分仙茅苷（Curculigoside）和苔黑酚葡萄糖苷（Orcinol glucoside，OG）是仙茅的主要活性成分。

苔黑酚葡萄糖苷，具有多种显著的药理活性，如在有抗氧化、抗骨质疏松、抗抑郁、抗焦虑及免疫调节等多种药理学活性较为明显，并对不同消化道癌细胞系有一定的细胞毒活性（强明敏等，苔黑酚葡萄糖苷药代动力学及药理活性研究进展，辽宁中医药大学学报，20210514）。 苔黑酚葡萄糖苷主要分布于仙茅等仙茅属植物中，在仙茅根状茎中含量较高,而这些植物对栽培环境要求较为苛刻，生长周期长，且产量低；此外，还具有提取工艺流程较为复杂、分离得率低等不足，使得苔黑酚葡萄糖苷的产量低，导致市场价格高。如何有效获得大量高纯度的苔黑酚葡萄糖苷，满足科学试验及市场应用需求，一直都是大家关注的焦点。

发明内容

为了解决如何高效快速获得大量高纯度的苔黑酚葡萄糖苷问题，本发明提供了一种仙茅糖基转移酶Co84A-471基因及在制备苔黑酚葡萄糖苷中的应用，所述仙茅糖基转移酶Co84A-471基因可作为苔黑酚葡萄糖苷的生物合成调控基因。

本发明提供的一种仙茅糖基转移酶Co84A-471基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明还提供一种所述的仙茅糖基转移酶Co84A-471基因编码的仙茅糖基转移酶。

作为优选，一种所述的仙茅糖基转移酶Co84A-471基因编码的仙茅糖基转移酶Co84A-471的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

本发明还提供了一种含有所述的仙茅糖基转移酶Co84A-471基因的重组质粒。

作为优选，所述的重组质粒，通过将所述的仙茅糖基转移酶Co84A-471基因与pET28a载体同源重组获得，命名为pET28a-UGTCo84A-471。

本发明还提供了一种转基因工程菌，含有所述的重组质粒，或所述基因工程菌的基因组中整合有外源的所述的仙茅糖基转移酶Co84A-471基因。

作为优选，所述的转基因工程菌为大肠杆菌BL21(DE3)菌株。

本发明还提供了所述的仙茅糖基转移酶或所述的仙茅糖基转移酶Co84A-471在制备苔黑酚葡萄糖苷中的应用。