[发明专利]海参硫酸多糖及其弱酸降解产物促进乳杆菌增殖中的应用

权利要求书

1.海参硫酸多糖及其弱酸降解产物在促进乳杆菌增殖中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述海参硫酸多糖、所述弱酸降解产物促进格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)的增殖。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述弱酸降解产物促进所述格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)和约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)的增殖。

4.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述海参硫酸多糖在体外培养中，促进罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)乳杆菌的增殖。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述海参硫酸多糖、所述弱酸降解产物促进格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)和罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)形成生物膜。

6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述弱酸降解产物在50～500μg/mL浓度时，促进罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)形成生物膜。

7.一种权利要求1所述海参硫酸多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将海参在90～100℃水中煮至蛋白质变性，沥干、制成块，冻干再置于0～10℃丙酮中浸泡12～48h，室温下晾干，得到冻干样品；

S2、取所述冻干样品，加入乙酸钠缓冲溶液、木瓜蛋白酶、乙二胺四乙酸和半胱氨酸，混合后，于50～60℃水浴振荡酶解，在4000～8000g、室温条件下离心取上清液；

S3、向所述上清液中加入氯化十六烷基吡啶溶液，室温下静置12～48h后，在4000～8000g、室温条件下离心取沉淀；将所述沉淀溶解于3mol/L的NaCl-乙醇溶液中，再加入80～95％乙醇溶液，0～10℃静置，然后在4000～8000g、室温条件下，离心取沉淀；

S4、用80％和95％乙醇分别洗涤，室温晾干，用蒸馏水溶解，用1000～4000Da的透析袋除盐，冻干后得海参硫酸多糖。

8.根据权利要求7所述海参硫酸多糖的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述乙酸钠缓冲溶液浓度为0.1～0.3mol/L且pH 6.0，所述木瓜蛋白酶质量比5～15％(w/w)，所述乙二胺四乙酸质量比2～6％(w/w)，所述半胱氨酸质量比1～5％(w/w)；步骤S3中所述NaCl-乙醇溶液中NaCl与乙醇的体积比为100：15v/v，所述氯化十六烷基吡啶溶液体积比为5～15％(v/v)。

9.一种权利要求1所述弱酸降解产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、取海参硫酸多糖溶于三氟乙酸中，水解至海参多糖全部降解为单糖和寡糖；

S2、浓缩干燥后，添加甲醇，再次浓缩干燥，直至完全去除三氟乙酸；

S3、以4000～8000g离心取上清液，将沉淀继续洗涤离心，再收集所有上清液，冻干后，得海参硫酸多糖弱酸降解产物。

10.根据权利要求9所述弱酸降解产物的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述三氟乙酸浓度为1.0～1.5mol/L，所述水解条件为在100℃下；步骤S2中所述海参硫酸多糖与所述甲醇的比例为1:1.0～2.5m/v。