[发明专利]海参硫酸多糖及其弱酸降解产物促进乳杆菌增殖中的应用

说明书

本发明提供海参硫酸多糖及其弱酸降解产物在促进乳杆菌增殖中的应用，用于促进格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)、约氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonii)和罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)的增殖以及形成生物膜。

技术领域

本发明涉及乳杆菌增殖领域，更具体地说，涉及海参硫酸多糖及其弱酸降解产物促进乳杆菌增殖中的应用。

背景技术

乳酸菌具有多种生物活性，包括改善胃肠道功能、维护肠道内微生态平衡、提高机体免疫力和降低血清胆固醇等。乳酸菌包括乳杆菌(Lactobacillus)、乳球菌(Lactococcus)和链球菌(Streptococcus)等，其中乳杆菌是乳酸菌中重要的一类。乳杆菌伴随人类的成长，从婴儿粪便中发现乳杆菌组成单一，主要是格氏乳酸杆菌(Lactobacillus gasseri)或唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)，而成人粪便中的乳杆菌菌株主要是鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)或副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。因此，乳杆菌也被认为是益生菌的一种。

艰难梭状芽胞杆菌感染是引起医院相关性胃肠道疾病的原因之一，艰难梭菌感染患者通常住院时间长，而且往往会造成医院感染的大爆发。对于在复发性艰难梭菌感染治疗的过程中，存在给患者服用抗生素(例如万古霉素、甲硝唑等)并且联合粪菌移植的治疗方案。对于该种治疗的术后恢复，目前尚无特定的有效方案。

发明内容

本发明提供了提供海参硫酸多糖促进乳杆菌增殖的新用途，以及海参硫酸多糖及其弱酸降解产物在促进乳杆菌增殖中的用途。

优选的，所述海参硫酸多糖、所述弱酸降解产物促进格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)的增殖。

优选的，所述弱酸降解产物促进所述格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)和约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)的增殖。

优选的，所述海参硫酸多糖在体外培养中，促进罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)乳杆菌的增殖。

优选的，所述海参硫酸多糖、所述弱酸降解产物促进格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)和罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)形成生物膜。

优选的，所述弱酸降解产物在50～500μg/mL浓度时，促进罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)形成生物膜。

一种权利要求1所述海参硫酸多糖的制备方法，包括以下步骤：

S1、将海参在90～100℃水中煮至蛋白质变性，沥干、制成块，冻干再置于0～10℃丙酮中浸泡12～48h，室温下晾干，得到冻干样品；

S2、取所述冻干样品，加入0.1～0.3mol/L且pH 6.0的乙酸钠缓冲溶液、5～15％(w/w)木瓜蛋白酶、2～6％(w/w)乙二胺四乙酸和1～5％(w/w)半胱氨酸，混合后，于50～60℃水浴振荡酶解20～30h，在4000～8000g，5～20min，室温条件下离心取上清液；

S3、向所述上清液中加入5～15％(v/v)氯化十六烷基吡啶溶液，室温下放置12～48h后，在4000～8000g，5～20min，室温条件下离心取沉淀；将所述沉淀溶解于3mol/L的NaCl-乙醇溶液中，再加入80～95％乙醇溶液，0～10℃放置24h，在4000～8000g，5～20min，室温条件下，离心取沉淀；