[发明专利]一种花生转录因子AhbHLH10基因及其克隆与功能表达方法

权利要求书

1.一种花生转录因子AhbHLH10基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用，其特征在于，所述AhbHLH10基因开放阅读框为1503bp，共编码500个氨基酸；所述AhbHLH10基因的全长核苷酸序列是序列表中SEQUENCE LISTING 1，所述AhbHLH10基因的氨基酸序列是序列表中SEQUENCE LISTING 2；将所述AhbHLH10基因通过转基因技术导入植物中，可以提高植物的抗旱性。

2.根据权利要求1所述的花生转录因子AhbHLH10基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用，其特征在于，扩增AhbHLH10基因全长所用引物为：

AhbHLH10-F1：5’-TGAGCATGTACGTGGACCCC-3’；

AhbHLH10-R1：5’-CGTACAAGTAACTACTTGTTCTTTGGTG-3’；

扩增条件为：

全长PCR扩增所用聚合酶为 GXL DNA Polymerase，全长PCR扩增反应体系包含10μL Buffer、4μL dNTP、1μL GXL、2μL总cDNA、1.5μL AhbHLH10-F1、AhbHLH10-R1和30μL无菌双蒸水；全长PCR扩增反应条件如下：(a)98℃，10S；(b)55℃，15S；共30cycles；(c)68℃，2min。

3.根据权利要求1所述的花生转录因子AhbHLH10基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用，其特征在于，AhbHLH10荧光定量RT-PCR所用的引物序列为：

AhbHLH10-R：5’-CCTTCTATTATCTTGCTATT-3’和

AhbHLH10-F：5’-TGTTGATGATGATGTTAC-3’；

荧光定量RT-PCR条件为：

荧光定量RT-PCR所用cDNA模板稀释到8ng/μL，使用的聚合酶是SYBR Green，采用的仪器是7500FAST荧光定量PCR仪，每反应体系加2μL稀释的cDNA；

RT-PCR反应程序为：(a)95℃，10s；(b)95℃，5s；(c)60℃，30s；(d)72℃，10s；40个循环。