[发明专利]一种利用染色体鉴定蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交后代真杂种的方法

权利要求书

1.一种鉴定蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交后代真杂种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

取亲本及子代的根尖，分别制成染色体标本，观察染色体数，确定亲本及子代的染色体倍性；当子代与亲本的染色体倍性不同时，则子代为真杂种；

当子代倍性与亲本中的一种或两种相同时，则通过核型分析进行确定，若子代的染色体核型与亲本的核型不同，则子代为真杂种。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述亲本或子代染色体数的确定方法包括：染色体标本中的细胞数≥10个，且以85％以上的细胞具有恒定一致的染色体数作为亲本或子代的染色体数。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述染色体标本的制备方法包括：取材、预处理、固定、解离和制片；

所述取材包括取亲本及子代新鲜的末端根尖5mm，每株植株取5个根尖。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述预处理包括：将取材后得到的根尖浸泡于饱和α-溴萘溶液中，在4℃的环境中静置24h。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述固定包括：将预处理后的根尖清洗后浸泡于卡诺氏固定液中，在4℃的环境中静置24h。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述解离包括：将固定后的根尖浸泡于1mol/L盐酸中，进行第一解离5～6min；然后将含有根尖的盐酸溶液加热至60℃，进行第二解离6～7min。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述第一解离的温度为25～30℃。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述制片包括：将解离后的根尖清洗后利用卡宝品红染色8～10min，得到染色体标本。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述清洗的溶剂包括超纯水；所述清洗的次数为3～4次。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述观察的显微镜倍数包括1000倍。